第十三章蛋白质的生物合成58.pptVIP

第十三章 蛋白质的生物合成 遗传信息传递的 中心法则 遗传信息流动示意图 目 录 蛋白质合成体系 mRNA 遗 传 密 码 三联体密码的破译 以均聚物为模板指导多肽的合成 以特定的共聚物为模板指导多肽的合成 核糖体结合技术 遗传密码字典 遗传密码的性质 1966年Crick根据立体化学原理提出： 原核细胞mRNA的结构特点 真核细胞mRNA的结构特点 tRNA 密码子与反密码子的配对关系 核糖体 核糖体的组成 原核细胞70S核糖体的A位、P位及mRNA结合部位示意图 真核和原核细胞参与翻译的蛋白质因子 第二节 蛋白质合成的机理 氨基酸的活化 N-甲酰甲硫氨酰-tRNAfMet的形成直接进入核糖体的P位 氨酰- tRNA合成酶特点 原核生物多肽链的合成过程 肽链合成的起始 肽链的延长 N-甲酰甲硫氨酰- tRNAfMet的形成直接进入核糖体的P位 进位:氨基酰tRNA进入A位 ，消化能量，能量来自GTP 肽键形成:在转肽酶的催化下，将P位上tRNA所携的甲酰甲硫氨酰转移给A位上新进入的氨基酰tRNA， 形成二肽酰tRNA. 移位 :空载的tRNA从核糖体的P位脱落,二肽酰tRNA由A位移至P位 , mRN移动3个核苷酸. 在肽链延长阶段中，每生成一个肽键，都需要直接从2分子GTP（移位时与进位时各1）获得能量，即消耗2个高能磷酸键化合物 肽键的形成 肽链的延长 在肽链延长阶段中，每生成一个肽键，都需要直接从2分子GTP获得能量，即消耗2个高能磷酸键化合物（移位时与进位时各1） ；但考虑到氨基酸被活化生成氨基酰tRNA时，已消耗了2个高能磷酸键, 所以在蛋白质合成过程中，每生成一个肽键，实际上共需消耗4个高能磷酸键。 肽链合成的终止及释放 mRNA遗传密码排列顺序翻译成多肽链的氨基酸排列顺序，保证准确翻译的关键是 : 一是氨基酸与tRNA的特异结合，依靠氨酰-?tRNA合成酶的特异识别作用实现； 二是密码子与反密码子的特异结合，依靠互补配对结合实现，也有赖于核蛋白体的构象正常而实现正常的装配功能。 蛋白质的加工修饰 Tu\Ts循环 多多核糖体与核糖体循环 真核生物多肽链的合成（自学） 肽 链 的 折 叠 胰岛素原的加工 多核糖体 第四节 蛋白质定位 信号肽假说简图 分泌蛋白质的合成和胞吐作用 带有导肽的线粒体蛋白质前体跨膜运送过程示意图 问答题 （1）释放因子RF1或RF2进入核糖体A位。 （2）多肽链的释放 （3）70S核糖体解离 5? 3? UAG 30S亚基 50S亚基 5? 3? UAG tRNA RF Ａ位上出现终止信号（ UAG、UAA、UGA ） 此后即转入终止阶段。 1、肽链末端的修饰： 大肠杆菌合成后脱甲酰化，N-端70%的Met被切除，真核生物Met全部被切除。 2、信号序列的切除 3、二硫键的形成 4、部分肽段的切除 5、个别氨基酸的修饰 6、糖基侧链的添加 7、辅基的加入 实例：胰岛素原的加工 合成完毕的肽链 多核糖体 3ˊmRNA 延伸中的肽链 5ˊ 核糖体循环 1、真核细胞核糖体比原核细胞核糖体更大更复杂； 2、起始氨基酸为Met，不是fMet； 3、肽链合成的起始：由40S核糖体亚基首 先识别mRNA的5’端-帽子，然后沿mRNA移动寻找AUG； 4、起始因子有12种，但只有2种延长因子和1种终止因子； 5、真核细胞种线粒体、叶绿体的核糖体大小、组成及蛋白质合成过程都类似于原核细胞。 肽链折叠是指从多肽链的氨基酸序列形成具有正确三维空间结构的蛋白质的过程。 体内多肽链的折叠目前认为至少有两类蛋白质参与，称为助折叠蛋白: （1）酶：蛋白质二硫键异构酶（PDI）； （2）分子伴侣 Lasky于1978年首先提出分子伴侣（mulecular chaperone）的概念，这是一类在细胞内能帮助新生肽链正确折叠与装配组装成为成熟蛋白质，但其本身并不构成被介导的蛋白质组成部分的一类蛋白因子，在原核生物和真核生物中广泛存在。 A链区 B链区 间插序列（C肽区） HS SH SH SH HS HS 信号肽 N C 核糖体上合成出无规则卷曲的前胰岛素原 切除C肽后，形成成熟的胰岛素分子 切除信号肽后折叠成稳定构象的胰岛素原 S S S S N N C C A链 B链 胰岛素 C N S－S S S 胰岛素原 S S 第一个编码区 第一个编码区 第二个编码区 第二个编码区 终止\起始 终止 起始 mRNA mRNA 5′ 5′ 3′ 3′ 1、分泌蛋白 ● 信号肽假说简图 ● 分泌蛋白质的合成和胞吐作用 2、线粒体与叶绿体蛋白 ● 蛋白质向线粒体的定位机制 3