原代培养人胎大脑神经元缺氧模型的建立及纳洛酮保护作用的分析.pdfVIP

天津医科大学硕士研究生论文 英文缩写 英文缩写 CNS 中枢神经系统 NC 神经细胞 LDH 乳酸脱氢酶 MTT 四甲基偶氮唑盐 NSE 神经元特异性烯醇化酶 ELISA 酶联免疫吸附实验 HPLC 高效液相色谱 NMDAR N．甲基．D．天门冬氨酸受体 EAA 兴奋性氨基酸 SCF 干细胞因子 NF 神经微丝 Rr-PCR 逆转录．聚合酶链反应 天津医科大学硕士研究生论文 中文摘要 原代培养人胎大脑神经元缺氧模型的建立及纳洛酮保护作用的研究 摘 要 目的：建立人胎大脑神经元的体外缺血模型，为研究急性缺血缺氧性脑损 伤的细胞和分子机制提供实验基础j、群应用上述模型就纳洛酮对神经元缺血性 损伤时保护作用的分子机制进行研究。Y方法：应用无血清原代培养人胚胎大脑 神经细胞的方法，经神经微丝染色证实为富含神经元的混合培养细胞。采用普 通培养设备和自制密闭容器对神经元进行缺氧结合无糖处理，建立人胎大脑神 经元的体外缺血模型，取培养上清液于缺氧前及缺氧后不同时点测定DH、 度；应用四甲基偶氮唑盐(MTT)测定缺氧前后细胞活力的变化：并提取细胞 内总RNA，应用逆转录聚合酶链反应扩增后，观察缺氧前后细胞内NSE、干 胞随机分组，于缺氧处理开始时给予不同浓度的纳洛酮，观察细胞外液MTr 显著性差异(P0．05)。③缺氧lhr组给予不同浓度纳洛酮后，随纳洛酮浓度的 增加，细胞外液LDH、NSE、谷氨酸浓度逐渐降低，细胞存活率逐渐增高 (P0．05)，至10p g／ml时恢复至对照水平。④轻度缺氧(30rain)后即刻，可 天津医科大学硕士研究生论文 中文摘要 内呈双峰分布；给予不同浓度纳洛酮后，随药物浓度的增加，各组表达量峰值 ^、， 降低，并且延迟出现，与对照组比较具有显著性差异(Po．01)一结论：结果 } 表明按照本实验方法，缺氧lhr即可达到损伤目的，可以作为神经元缺氧损伤 的体外模型，用于缺血性脑损伤细胞和分子机制的研究。纳洛酮对体外培养神 经细胞的缺氧损伤具有保护作用。本实验表明其保护机制与抑制兴奋性氨基酸 的神经毒性及调节多种保护性因子的表达有关。 关键词 原代培养神经元缺血性缺氧 体外模型纳洛酮细胞机 制分子机制 天津医科大学硕士研究生论文 英文摘要 of Establishmentculturedhuman neuron primary embryo anoxia of