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- 2017-09-02 发布于天津
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调节性t细胞专辑(二) - 基因有限公司
调节性T细胞专辑(二)
(Regulatory T Cells)
BD 的259D/C7 克隆——Foxp3 蛋白鉴定最佳抗体
抗体特异性的好坏,即抗体能否特异性地结合特定的抗原,是选择正确抗体的关键。由于抗体识别抗原的相对
较小区域,不同的抗体结构和结合位点都会影响抗原抗体结合的亲和力。在不同Foxp3抗体中157B/F4和86D/D6克隆
主要识别人类Foxp3中第一外显子(aa1-70 ),150D/E4克隆主要识别第二外显子(aa70-105),而206D/B1、236A/E7
和259D/C7克隆识别N末端(aa105-235 )表位(图1B)。由于人Foxp3存在两种异构体:一种对应于经典的全长序列
(Foxp3),另一种缺少第二外显子 (Foxp3δ2 ),因而150D/E4克隆是无法检测exon2缺失亚型的。
Bridget C. Fox等对上述几种不同克隆的抗体对Foxp3的结合力进行了比较试验,结果发现,无论是免疫组化还是
流式结果BD的259D/C7克隆都表现出对Foxp3很强的反应(图1A)。而150D/E4和206/B1克隆在流式和免疫组化实验
中都表现出对Foxp3的低亲合力。在Western Blot实验中,259D/C7和206D/B
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