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第一章 血液标本的采集与抗凝
第一章 血液学一般检验(1、2) 主讲 魏彦刚 绪 论 一、临床检验(clinical laboratory technology or science) 教学目标 1、了解血液的生理特性 2、掌握血液标本的采集方法及注意事项 3、掌握血液标本的采集部位 4、掌握血液标本的抗凝及抗凝剂 5、掌握血涂片的制备方法 教学内容 1、一般血液学检验概述 2、血液的生理特性 3、血液标本的采集 4、抗凝剂 5、血涂片的制备 教学重点 教学重点: 血液标本的采集方法及注意事项 血液标本的采集部位 血液标本的抗凝及抗凝剂 教学难点 血液标本的抗凝 第一章 血液学一般检验 一、血液生理概要 1. 血液的组成 血细胞(红细胞、白细胞、血小板)+血浆组成 血清与血浆的概念和区别 血浆缺少某些凝血因子 血细胞组成 2. 血液主要的理化性质 (1)血量 血浆量与血细胞量的总和 成人约4~5升,约占体重的6%~8% (2)颜色 红色, 血红蛋白 动脉血: 鲜红色。 静脉血: 暗红色。 严重贫血患者的血:红色变浅。 严重CO中毒或氰化物中毒:樱红色 高脂膳食后血浆:呈乳白色 溶血:呈不同程度的红色。 (3)红细胞在血浆中的悬浮稳定性 均匀混悬状态: 1.红细胞膜唾液酸根带有负电荷,形成Zeta电位 2. 血浆成分、血浆粘度及血流动力学等 (4)粘滞性 取决于血细胞比容和血浆粘度 健康成人: 全血粘度为生理盐水粘度的4~5倍 血浆粘度为生理盐水粘度的1.6倍左右 (5)比重和渗透浓度 全血比重:男性约为1.055~1.063女性约为1.051~1.060;与红细胞的百分比有关 血浆的比重约在1.025~1.030之间,与蛋白浓度有关。 血浆渗量(渗透压): 290~310mOsm/kg·H2O。 (6)pH 血液pH值为7.35~7.45 (7)凝固性 与凝血因子激活有关 3. 血液的功能 (1)运输功能 氧气和营养成分 (2)协调功能 (3)维护机体内环境稳定 (4)防御功能 二、血液标本的采集 1. 毛细血管采血法 采血部位: 左手中指或无名指指端内侧为宜,婴幼儿大趾及足底内外侧缘部采血,严重烧伤的患者选择皮肤完整处采血。 采血器材:带刃三棱针或一次性使用“专用采血针”为好 穿刺深度:3mm 采血顺序:血小板计数、红细胞计数、血红蛋白测定、白细胞计数、血型鉴定。 如图 2. 静脉采血法通常采用肘部静脉 三、血液标本的抗凝 抗凝:用物理或化学的方法,除掉或抑制血液中某些凝血因子以阻止血液凝固的方法 抗凝剂:能阻止血液凝固的化学试剂 常用化学抗凝剂: 1. 枸橼酸钠(trisodium citrate) 也称柠檬酸钠配成109mmol/L或106mmol/L的溶液。 抗凝原理: 枸橼酸钠与血液中的钙离子形成可溶性螯合物,阻止血液凝固。 Na3C6H5O7+Ca2+→CaC6H5O7-+3Na+ 枸橼酸钠用于血栓与止血检验(1:9 )及红细胞沉降率( 1:4 )等的测定,也多用于配制血液保养液。 2. 乙二胺四乙酸(EDTA)盐 EDTA盐有二钠、二钾和三钾盐,与血液中的钙离子结合形成螯合物,从而阻止血液凝固。 Na2C10H12O8N2+Ca2+→CaC10H12O8N2+2Na+ 对血细胞形态和血小板计数影响较小,适用于多项血液检查,尤其是血小板计数。但其影响血小板聚集和白细胞吞噬功能,故不适于血栓与止血检查及血小板功能检查。 3. 草酸钠 与血液中的钙离子形成 草酸钙沉淀阻止血液凝固。 Na2C2O4+Ca2+→CaC2O4↓+2Na+ 4. 双草酸盐抗凝剂 草酸钾可使红细胞 ,草酸铵则可使红细胞 ,按适当比例混合不影响红细胞形态和体积,可用于血细胞比容、血细胞计数、网织红细胞计数等项目 双草酸盐作用于RBC形态变化示意图 草酸钾 5. 肝素 肝素能阻止凝血酶形成 和抑制血小板聚集 肝素具有抗凝能力强,不影响血细胞体积,不引起溶血 肝素会引起白细胞聚集,使血涂片染色产生蓝色背景,不能用于白细胞计数和分类计数 四、血涂片的制备 好的血涂片:厚薄适宜、头体尾分明、染色良好 1. 载玻片的清洁 新玻片常用浓度约1mol/L HCl浸泡24h后用清水彻底冲洗,干燥后备用。 用过的载玻片可放入含适量肥皂或其它洗涤剂的清水中煮沸20min,趁热将血膜刷洗干净,再用清水反复冲洗干燥备用。 使用载玻片时,切勿用手触及玻片表面,以保持玻片清洁、干燥、中性、无
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