水通道蛋白1基因过表达对k562细胞红系分化和增殖的 - tumor - 肿瘤.pdf

肿瘤2012 年7 月第32 卷第7 期　TUM OR Vol. 32, J uly 2012　　 489 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2012 .07.002 Copyright© 2012 by TUM OR Basic Research 基础研究 · 水通道蛋 白1基 因过表达对K562细胞红系分化和增殖的影响 1 2 1 1 危　敏 ，姜　立 ，王妮莎，马文丽 1. 南方医科大学基因工程研究所，广州　510515 ；2 . 广东省人民医院科教处，广州　510080 [ 摘 要 ]　 目的：探 讨 水 通 道 蛋 白 1 （aquaporin-1，AQP1 ）过 表 达 对 人 慢 性 髓 细 胞 白血 病 （chronic myeloid leukemia ，CML ）K562 细胞红系分化和增殖的影响。方法：以人脑 cDNA 文库为模板，通过 PCR 扩增出A QP1 基 因的编码序列，构建 pBABE-puro-AQP1 真核表达载体；感染 K562 细胞，筛选建立稳定过表达 A QP1 基 因 的 K562 细胞株 （命名为 K562-AQP1 ）；实时荧光定量 PCR 法、细胞免疫荧光染色法及蛋 白质印迹法分别检测 γ AQP1 转录和蛋 白表达水平。通过 MTT 法检测细胞生长增殖、实时荧光定量 PCR 法检测 珠蛋 白表达和分光 光度法检测血红蛋白含量，研究 AQP1 过表达对 K562 细胞红系分化和增殖的影响。结果：与空载体对照组相比， pBABE-puro-AQP1 转染入 K562 细胞后 AQP1 mRNA 和蛋 白表达水平 皆有显著升高 （ P ＜ 0.01 ），K562-AQP1 γ 细胞中红系分化指标 珠蛋 白和血红蛋 白表达水平明显增加，同时细胞生长速度明显降低 （ P ＜ 0.05 ）。结论： AQP1 过表达可以显著促进 K562 细胞向红系分化，同时抑制细胞增殖。推测 AQP1 可能成为临床诱导分化治疗 CML 的基因靶点之一。 [ 关键词 ]　白血病，髓样；水通道蛋白1；基因表达；细胞分化；细胞增殖；K562 细胞 [中图分类号]　R733.72 [文献标志码]　A [文章编号]　1000-7431(2012)07-0489-06 Effects of aquaporin-1 gene overexpression on erythroid differentiation and proliferation of chronic myeloid leukemia K562 cells 1 2 1 1 WEI Min , JIANG Li , WANG Ni-sha , MA Wen-li 1. Institute of Genetic Engineering, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China; 2. Office of Science and Education, Guangdong General Hospital, Guangzhou 510080, C