hiv抗体检测的要点.ppt

HIV实验室检测技术 张家口市疾病预防控制中心 刘琪琛 2010.5.26 窗口期的意义 窗口期：广义的讲，从病原体侵入机体到用现行的实验室手段可以证明受到感染的期限称为窗口期。 狭义的讲，HIV感染后至抗体检出前的一段时间称为窗口期。检测HIV感染的实用方法是检测抗-HIV，在免疫功能正常人群，其窗口期为2-12周。 正确选择检测时机—通常在危险暴露后3个月检测，把握度在95%以上 正确解释检测结果---阴性只能说明3个月以前没遭受感染，不可以说“检测没事儿” “安全用血”—只是相对做到安全，因处于窗口期的供血，检测不到抗-HIV。 HIV感染急性期（早期）：症状出现在感染后6周以内，类似感冒，出现异常淋巴细胞升高 潜伏期：感染到AIDS发病前，数月-10年以上。抗-HIV阳性、P24抗原或病毒分离在早期阳性，以后不定或阴性，核酸检测由阳性到不确定到阳性 艾滋病早期：持续发热、持续淋巴结肿大、可以有持续性腹泻；体重减轻，可以发生机会性感染 艾滋病期：保持和发展AIDS早期症状，出现多种机会性感染，神经细胞和功能损伤的表现，易发生多种肿瘤 * AIDS的病程通常2年 　 关于检测抗-HIV的残余危险度 含义：在目前条件下，筛查后仍具感染性的机率 称为残余危险度。 影响因素： * 窗口期和检测时机的选择问题 * 实验室质控 * 个别人免疫功能低下，对HIV无反应 * 试剂质量和保存问题 * 是否在有效期内使用 * 试验操作错误：标本或结果登记的差错、仪器校准否、 错误的操作 前病毒 HIV进入宿主靶细胞后，病毒RNA利用自身的逆转录酶进行逆转录，合成病毒基因组的双链DNA分子。在整合酶的作用下（在细胞核内），双股DNA整合入宿主细胞染色体DNA中，这种整合的病毒双股DNA即称为前病毒。 抗-HIV初筛试验结果的解释和处理 抗-HIV阳性：极大可能为HIV感染，也可能属于非特异反应 抗-HIV弱阳性：存在真阳性和假阳性两种可能 抗-HIV阴性：极大可能无HIV感染，不排除阳性的可能（存在感染因素下检测时机不合适） 通常的抗-HIV检测结果的处理 结果 试剂1 试剂2 处理意见 A ＋ ＋ 再次采样，做确证实验 B ± ±或 ＋ 再次采样，做确证实验 C ± － 报告抗-HIV阴性 D － 不必复检 报告抗-HIV阴性 疫情报告 * 责任疫情报告人：《中华人民共和国传染病防治法》及其实施办法规定，执行职务的医疗保健人员、卫生防疫人员是传染病责任疫情报告人。 * 报告时限和方法：责任疫情报告人发现AIDS患者、疑似AIDS患者或无症状HIV感染者时，城镇于6小时内、农村于12小时内，以最快的通讯方式向当地卫生防疫机构报告，并同时报出传染病报告卡。 HIV抵抗力 HIV一旦离开宿主在外界环境中生存能力便很快消失，HIV对环境中的物理因素和化学因素抵抗力均较弱，比乙肝病毒（HBV）的抵抗力低得多。因此，对HBV有效的消毒和灭活方法均适用于HIV。 HIV抵抗力--物理因素 HIV对热很敏感，对低温的耐受性强于高温。因此，可以用高温灭活HIV，在低温条件下保存HIV。 对紫外线不敏感：用紫外线、γ射线不能灭活HIV。 HIV抵抗力--物理因素 HIV灭活：美国疾病控制中心证明，在干燥环境中的HIV 浓度在几小时之内降低90～99% （即降低1～2 log ）。在室温（22～27℃）液体环境下HIV可存活15天以上；经56℃处理30分钟，可使HIV在体外对人T淋巴细胞失去感染性，但不能完全灭活血清中的HIV；血清中HIV经过60℃3小时或80℃30分钟作用后不能检出感染性HIV。目前，世界卫生组织推荐的逆转录病毒灭活方法是100℃20分钟。 HIV抵抗力—化学因素 HIV耐碱不耐酸：在pH3.0条件下HIV滴度在10分钟可下降4个对数级，而pH值高达9.0时，HIV滴度下降甚微。 对含氯消毒剂敏感。0.5％次氯酸、2％戊二醛溶液、3％碘酒、6％过氧化氢可在3～5分钟内灭活HIV。 实验常用的消毒办法 高压蒸汽灭菌 (121℃ 20分钟) 干烤 170℃ 2小时 煮沸 20分钟 消毒剂浸泡30分钟，常用消毒剂为5％可用氯(次氯酸钠、次氯酸钾、氯氨T)、6％过氧化氢、2％