bFGF复合缓释剂对失神经骨骼肌萎缩影响的实验分析.pdfVIP

中文摘要 刖 茜4 失神经骨骼肌萎缩，影响肢体功能恢复，一直是临床急待解决 的一个难题。本文认为失神经并非是其继发为不可逆肌萎缩的直 接原因，不可逆肌萎缩的发生可能是由于结缔组织增生所致。为 此本实验试图使用bFGF复合缓释剂，在延缓失神经骨骼肌肌细 胞本身萎缩速度的同时，抑制胶原纤维合成减轻其对肌细胞的压 迫，从而了解结缔组织增生对肌萎缩的作用和达到延缓不可逆肌 萎缩出现的目的。 实验材料与方法 随机将56只大鼠分4组，各组14只，左肢为失神经支配的腓 肠肌(实验侧)，右肢为正常腓肠肌(对照侧)。A组左侧腓肠肌 内，分别置入装有bFGF硅胶管和抑制胶原纤维合成抑制剂的硅 胶管；B组：左侧腓肠肌内，分别在与A组相同部位肌肉内置入两 支装有胶原纤维合成抑制剂的硅胶管；C组：左下肢腓肠肌内，相 应一致部位，置入两条含有生理盐水的管；D组：左下肢腓肠肌内， 不置任何药物。 腹腔麻醉下，暴露清楚坐骨神经，并在各组相应一致部位切断 神经，将半透管置于肌膜和肌肉之间。 术后30天和90天，分别对各组腓肠肌，进行如下指标观察： 1电生理指标测试：主要观察各组失神经腓肠肌纤颤电位波 幅，以了解各组肌萎缩变化。 2腓肠肌湿重测试：在同一条件下，完整的切下各组失神经腓 肠肌，测其重量，再通过统计学t检验处理。 3组织学切片标本：将左下肢失神经各组腓肠肌及右下肢腓 ·l· 肠肌，从肌腹中央横断为两部分，制成7um厚的光镜切片，然后再 制成不同染色标本。 (1)HE和Mallory染色连续切片及维生素C银染切片：主要 观察各组肌纤维结构萎缩变化和肌纤维间结缔组织增生变化。 (2)透射电镜标本：主要观察萎缩肌肉中线粒体，肌丝等结构 的变化。 (3)琥珀酸脱氢酶(SDH)标本：主要观察萎缩肌肉中肌纤维 类型变化。 4肌动蛋白免疫组织化学染色标本：按常规ABC法染色，在 相同条件下，测量肌动蛋白染色后灰度，再行统计学t检验处理。 5图像分析仪测定：400倍光镜下，测定同一单位内的如下内 容：(1)肌纤维数量(条)(2)肌纤维直径(“m)(3)肌纤维截面积 统计学t检验处理。 实验结果 1．肉眼观察 各组失神经支配腓肠肌较正常腓肠肌有明显萎缩变化，各组 腓肠肌对比：(1)A与B组的腓肠肌明显较C与D两组的大，与周 围结缔组织也较C与D两组粘连的轻(2)B组腓肠肌较A组的小， 与周围组织粘连也较A组的重，但C与D两组间的差异不够明 显。这表明各组失神经腓肠肌均发生萎缩和周围结缔组织长人， 但是，置人药物的A与B两组腓肠肌均明显较不置药的C与D两 组的肌萎缩和结缔组织增生的轻，表明本实验采用的试剂有延缓 肌萎缩和抑制结缔组织增生的作用。 2．镜下观察 (1)光镜：在术后30天和90天各组失神经腓肠肌的H．E， Mallory及维生素C银染切片上，可见较其各自右肢正常腓肠肌有 ．2． 明显萎缩改交：肌纤维变细、变少，横纹模糊不清，肌细胞核增多， 圆形肌细胞变多。失神经支配各组腓肠肌的对比：A与B组较c 与D组的腿纤维束完整，肌纤维排列紧密，肌纤维较C与D两组 的多丽粗，横纹演楚的肌纤维和肌核也较多，相反圆形肌纤维较 少。A组腓肠肌萎缩变化较B组的轻，c与D组的肌纤维萎缩变 化凭显著不周。 ’ 在失神经各组用F肠肌攒断斌SDH染色切片上，各组腓肠肌的 自肌纤维转为红肌纤维的差异上纛，可知A与B组腓肠肌较C与 D两组的萎缭进展的慢，A组明显忧予其它务组。 综合上述失掉经各纽崩}肠肌变化差异，可以认为本实验用的 bFGF复合剂或只用抑制胶原纤维合成抑制剂，均有抑制结缔组织 增生瓢延缓肌纤维本身萎缩的作用，bFGF复合剂可能效果更好。 (2)电镜：在透射电镜标本上，失神经各组雕肠肌虽然都有程 度不同的肌丝排列紊乱、线粒体消失期糖元颗粒减少等变性改变 的肌纾维，但是C与D甄组腓肠肌如此变性结构的肌纤维