GBE50对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制分析.pdfVIP

GBE鼬对大鼠脑缺呶蒋灌注损伤的保护作用及其机制研究 摘要 耳的：研究银杏提取物新制剂GBE50对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其 与氧化应激、炎藏免疫爱瘟之阚瓣关系，戳掇示GBE50霹弦款纛臻密缳 护作用的药理作用机制。 方法： 1．整体动物水平神经保护作用的观察： 雄性SD大鼠，250．300 m眺g)。连续绘药14天后，建立大鼠大脑中动 GBE50(100mg／kg)，TG(10 cerebral 脉梭塞fMiddle artery 5分制评分标准对大鼠进行行为学评分：采用TTC染 lh．8h．24h。按Longa 色方法进行脑梗塞体积测定；抗凝血进行血液流变学测定。戏察OBE50对大 鼠缺赢再灌注后脑横塞体积、神经行为学及疵液流变学指标的影响。 2．原代培养神经细胞上抗氧化应激作用的观察： 采用薪生大鼠神经元原代培养技术，皮滕神经元培养7天，用100umol／L 对酣202所致神经细胞氧化成激的作用。脱氡核糖滋测定银密内酯炎清除羟 基套密基簿瀚。 3．在蛋自与mRNA水平抗炎鼗免疫反应作用的观察： GBE50(100mgmg)，OBES0(50mg／kg)，GBE50(25mg／kg)，TG(10mg／kg)。 连续给药14天嚣， 建立大袋大胺孛动豫栓塞fMiddlecerebral artery 灌注阗定藏缀绥，取藏，球壤甥冀，羯免疫缀纯法瓣定藏缝绫TNF-d、I己．1 B 8蛋白：或快速断头取脑，RT-PCR法测定新鲜脯组织TNF—Q、IL．1 mRNA，瑷察GBE50黠TNF．8、IL*l§表达熬嚣稚。 结果： |．整转动耱实验络象显零；鬏手零缝丈藏藏组织寒发蕊蠖塞建，静经孬为学无 异常。与假手术组相比，模型组大鼠手术侧脑组织出现明显梗塞灶(8h：O．339 主壅塑墅—— O．71)，血液流变学指标明显异常。与模型组相比。GBE50可明恩减小脑梗塞 俸耪(8h：0．218±0 24h：1．8±O．45)，改善m液流变学，有摄著性差异。TG也可减小脑梗塞体积， 改善享率经{亍为学，毽蹲矗滚流变学影瘸不甥要。 2．细胞水平实验结果显示；H202可对原代培养大鼠皮层神经元产生剂量依赖性 氧亿应激损伤，GBE50对}{202损伤裤经元呈荆量依赖性僳护干#用。TG也可 对H202损伤神经元产生明显的保护作用。体外实验结果显示：银杏内酯类 在俸并可有效游除羟蒸自由基，G囊、G．B、G．C及BB的le50分掰为：278．o、 umol几。 21．9、22．0、18．2 3．免疫缀纯结果鼹示：镁手术组大鼠皮层仅有少潦IL．113和TNF．q免疫阳性细 胞。模型组缺戚再灌注lh、8h、24h臌，缺血侧皮层m．1§、TNF．a免疫阳 B、TNF．a 往细胞数明显增多。与模型组榍眈，GBE50组鬻灌注各对问点IL．1 免疫反应阳性细胞明显减少。脑片光密度扫描结果显示，模型组与假手术组 假手术组太鼠皮层IL．1p和TNF．QmRNA少量表达，模型组备时间点IL．1B 霜TNF，a mRNA表达稳鞠显露加。GBES0可硬显搠黼缺盘再灌注看各时闻 点皮层IL．113mRNA的袭达。 绪论： l。实验诞明，GBE50霹龌显减小大藏MCAO袋纛霉灌滚爱毖援塞镩鬏，馥善 血液流变学，敬善MCAO大鼠行为学评分。从整体动物水平证明了GBE50 对舷缺斑再灌淀损侥蠢攘护侔蹋。缝巢提示，改善盘滚滚变学怒GBE50蘧映 血保护作用的机制之一。 2。实验程冁，GBE50对遵02氧像应激袋伤耱经元呈裁豢猿赖经绦护。体捧研 究证明，银杏内酯