白芨多糖在日化产品中的应用研究.ppt

白芨多糖在日化产品中的应用研究 汕头市康王精细化工实业有限公司 南京野生植物综合利用研究院 二零零八年九月二十日 一、白芨简介 白芨[Blettila striata(Thunb. ) Reichb. f. ]兰科白芨属，又称小白芨、莲及草、甘根、白根、竹粟胶、雪如未，白芨千百年来一直作为传统中药使用，其主要功能是敛疮止血、补肺、消肿生肌，可治疗吐血、肺病、咳血、慢性胃溃疡等。白芨具有较强的抗菌作用，对多种皮肤病有良好的疗效，为消炎止痒，清热解毒、去腐生肌的传统药用植物，由于其无毒，无副作用，特别适合作为天然化妆品的功能组分。白芨具有止血消肿、去腐生肌、润肤保湿等功效。民间常用于治疗痈疽肿毒、创伤、灼伤、手足皸裂和溃疡等症。药理研究表明白芨葡甘露聚糖止血、润肤作用十分明显。据临床报道，白芨治疗溃疡、手足皸裂和创伤出血效果显著，有促进肉芽组织新生、保护创面、加速伤口愈合等作用。 二、研究内容 1.白芨多糖的提取与精制工艺研究 2. 白芨多糖作为功能成分研究 3.白芨多糖的安全性评价 4.白芨多糖牙膏及护肤品产品开发 三、 白芨多糖的提取与精制工艺研究 白芨多糖的提取和精制工艺主要有水提法，乙醇—水提法，连续逆流提取法，这些方法提取所得产品得率一般不高，且产品的纯度较低，粗白芨多糖纯度一般低于80%，色泽略黄，且带有药味，大大限制了白芨多糖胶的应用，需要进一步精制。我们研究了生物酶法精制和溶剂处理相结合的白芨多糖胶精制纯化工艺。 工艺技术方案的理论基础： (l)侧链基团对杂质的缠绕作用较大，通过蛋白酶进行修建； (2)蛋白酶可以起到部分脱除糖蛋白作用，在去除蛋白基团的同时，也使结合到蛋白上的部分杂质予以去除； (3)通过复合溶剂处理，使脂类、色素类成分予以清除。 结果表明，不同蛋白酶均可以部分脱除白芨粗多糖中的蛋白，其中木瓜蛋白酶脱除率达到53.8%，其次是Amano公司的蛋白酶 A。随着蛋白成分从多糖中脱除，多糖纯度大幅度提高，提高最大的是木瓜蛋白酶，精制后多糖纯度达到91.2%，其次是麋蛋白酶，精制后多糖纯度为88.6%。值得注意的是麋蛋白酶，其蛋白脱除率却只有19.8%，是五种蛋白酶中蛋白脱除率最差的，但它的精制效果仅次于木瓜蛋白酶，这种现象侧面说明了白芨多糖中，蛋白及其缀合物存在多样性。 2.木瓜蛋白酶酶解条件研究 木瓜蛋白酶属巯基蛋白酶，主要作用于蛋白质中L-精氨酸、L-赖氨酸、甘氨酸和L-瓜氨酸羧基参与形成的肽键，具有较宽的底物特异性，对底物特异性要求不严格，因而对多糖成分中的杂蛋白脱除效果较好。实验选择木瓜蛋白酶，进一步研究白芨多糖胶的酶法精制，重点考察加酶量、处理温度、溶液pH及处理时间对精制效果的影响。 在2%的白芨粗多糖溶液中，分别加入不同质量的木瓜蛋白酶，在pH7.0，温度50℃条件下处理180min。结果表明（图1.1），随着酶浓度提高，多糖纯度呈上升趋势，当酶用量大于10mg/g底物时，精制后多糖纯度大于90%，此时蛋白脱除率也在40%以上。进一步增加酶用量，脱除率增加有限，因而8～10mg/g底物的用量较为适宜。 50℃下酶处理180min后的白芨多糖纯度在88%左右，但其余组也在83%以上，因而酶处理温度对精制效果影响不大。但考虑到在较高的处理温度下，白芨多糖粘度损失较大，因而从提高产物稳定性角度考虑，适宜的处理温度应选择45～50℃。 天然白芨多糖胶溶液呈偏酸性，pH范围在5.0～6.0之间，这也是木瓜酶的适宜pH范围。但实验发现，在体系pH呈弱碱性时，精制效果更佳，其多糖纯度、脱蛋白率均优于弱酸性体系（图1.3）。体系pH既影响水解酶的反应活性，也影响反应底物的解离和空间构象，由于白芨粗多糖中的杂蛋白，结合了较多的非糖类成分，这些物质在不同pH下的解离和变构存在差别，使酶促反应受到影响。实验表明，采用木瓜酶对白芨粗多糖进行精制，其适宜pH为7.0～7.5。 尽管白芨粗多糖中蛋白含量不高，但是组成复杂，且多糖溶液粘度大，因而需要较长的水解时间。在实验的水解体系下，2％的底物，5mg/g底物的加酶量，需要120min才能脱除40%以上的蛋白，并使多糖纯度达到90%以上（图1.4）。同样，为避免长时间加热，水解时间不宜太长，120～150min较为适宜。 3.讨论 确定了木瓜蛋白酶脱除白芨多糖胶中蛋白精制的最佳工艺条件为：酶浓度5mg/g，pH7.0，作用温度40℃，酶解时间60min。在上述实验条件下，所得精制白芨胶中葡甘聚糖含量达到97％，蛋白剩余含量从0.91％下降到0.32％。与Sevag法多次脱蛋白的效果相比，具有明显的优势。采用酶法精制等技术，白芨胶提取率大于95％，精制胶收率大于28%，精制白芨胶中甘露聚糖含量大于95%。 四.白芨多糖作为功能成分研究 生物学功能试验