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动物胚胎工程研究进展1摘要动物胚胎工程技术是动物生物技术的重要组成部分之一，动物胚胎工程技术在二十世纪后期发展极为迅速，近年来胚胎工程技术的应用效益最为显著，也是21世纪世界经济增长的重要支撑技术之一， 现代动物胚胎工程的概念涵盖所有对动物配子和胚胎进行工程化操作的技术方法。 2动物胚胎工程主要技术体系：第一类是胚胎移植相关技术，包括超数排卵与胚胎移植技术、胚胎体外生产技术、胚胎移植前性别鉴定技术与动物性别控制技术、卵母细胞与胚胎的冷冻保存技术；第二类为动物克隆技术，包括胚胎分割技术、细胞核移植技术和胚胎嵌合技术体系；第三为转基因动物技术；第四类为胚胎干细胞技术。其中胚胎干细胞技术的主要研究意义在于发育生物学基础理论和人类医学组织工程，前三类胚胎工程技术在动物生产领域有重要的实践意义。3 动物胚胎工程技术研究进展3.1 胚胎移植：胚胎移植是胚胎工程的一项极其重要的基本技术，采用任何新技术所产生的胚胎，都必须通过胚胎移植才能得到后代。科学家首先成功移植了兔胚胎，随后小鼠、大鼠及多种哺乳动物的胚胎移植试验相继获得了成功。胚胎移植技术已被证实是奶牛繁育的一次重大变革，极大提高了优秀母牛的利用率，有利于产生更多优秀后备母牛和更多优质种公牛。我国胚胎移植技术始20世纪70年代 中期，目前全国大多数省区开展了这一项目研究。胚胎移植已在我国高技术研究和有关学科的基础研究中得到广泛的应用 2 排卵控制：排卵控制涉及排卵时间控制和排卵数量控制。控制排 卵时间的目的是得到特定发育阶段的卵母细胞，如做微注射转基因使用的原核胚。排卵数量的控制又称为超数排卵。在正常情况下，哺乳动物一次排卵数极其有限。经超数排卵处理，排卵数则可增加数倍至10余倍。因此，在生产上或科学试验中，通过超数排卵处理可获得大量胚胎。据不完全统计，利用超排技术一次可从每头供体 牛获得可移植胚胎数平均为5枚。3 胚胎冷冻保存： Whittingham于 1971年首次报告冷冻保存小 鼠胚胎获得成功，继而兔胚胎冷冻保存也获成功。迄今至少有10余种哺乳动物(包括人)的冷冻胚胎移植后可以正常发育为幼体。现在世界上建成的胚胎库正在生产、科研和服务人类等广大领域中发挥作用 胚胎冷冻保存分短期低温(0℃～4℃)和长期储备保存(液氮-196℃)。长期储备保存打破了时间和空间的限制，可随时随地移动，便于地区和国际间的品种资源交流。对于一些优良动物(包括珍稀和濒危动物)，通过保存胚胎可将种质长期保存下来，并在任何时候运送到世 界各地繁衍。冷冻保存的胚胎应等待受体动物生殖系统的生理状态处于与胚龄同期化时移植，以提高胚胎移植成功率。卵母细胞的冷冻保存可为体外受精、核移植、基因转移等生物技术提供充足的材料，同时也可为动物的资源保存提供可能。4 体外受精与显微受精：1951年 Chang和Austin首次发现哺乳动物精子获能现象，开创了哺乳动物体外受精研究的新纪元 。体外受精所用的精子在大 、中型动物上可采用人工采精获得，小动物从附睾获得。卵子来源有两种方法：小动物采用超数排卵处理，从输卵管采集成熟卵子或从卵巢采集未成熟卵子进行体外成熟；牛、羊等动物可利用活体采卵或屠宰卵巢获得。以不同动物为对象开展体外受精研究的目的不尽相同。实验动物主要用于进行受精生物学、发育生物学和繁殖学的基础性研究，也可作为家畜和人的模型，建立各环节的关键技术。对家畜的研究主要着眼于经济效益，利用屠宰母畜的卵巢分离卵母细胞生产大量廉价胚胎，并可促进其他高技术的研究 和发展。对人类的有关研究，目前主要是治疗不育症，将来也许会在优生学方面起重要作用。迄今世界上约有20种哺乳动物(包括人)，其卵子与精子可在体外培养条件下完成受精作 用和卵裂。但通过体外受精、胚胎培养和移植，得到后代者包括人在内仅10余种。2010年度的诺贝尔医学或生理学奖就是授予了发明试管婴儿技术的科学家罗伯特 一 爱德华兹，以表彰他在人类体外受精技术领域做出的开创性贡献。随着显微操作技术和设备的完善，出现了显微受精技术。这种技术又称辅助受精，是指将完整精子或精核用显微操作仪注入卵周隙或卵胞质，激活卵母细胞并完成受精作用。将单个精子注入胞质，无需由精子自身穿过卵丘、放射冠、透明带以及精、卵融合进入卵中。因而显微受精过程不受精子的数量、活力和形态等因素的影响。目前有透明带下注射、透明带钻孔、透明带部分切口和卵细胞质内注射等方法。前三种技术可排除透明带对精子入卵的屏障作用 (这时的精子能游动且能穿入卵质膜)，卵细胞质内注射可解除精子穿人透明带和精卵质膜两重屏障作用。最早是将仓鼠的精子显微注射到仓鼠的卵母细胞内获得了原核，得到了后代。我国于 1993年首次获得了显微受精仔兔，随后在小鼠上用附睾精子、球形精、次级精母细胞乃至初级精母细胞注射均获得了正常发育后代。5 胚胎分割：胚胎