根癌农杆菌介导人乳铁蛋白基因转化中国水仙的初步研究.pdfVIP

内容摘要 tazetta 中国水仙(Narcissus 重要的观赏价值和经济价值。但因其栽培历史悠久，病毒病危害有日 趋严霞之势，影响了中国水仙的商品化生产。中国水仙为三倍体植物， 难以通过行陀杂交方式选育新晶种。基因工程技术的发展和应用为花 卉新品种培育提供了_套金新思路。本文研究了中困水仙高效再生体 系和遗传转化体系的建立，依照该体系，通过根癌农杆菌将具有抗细 菌和病毒作用的人乳铁蛋白基因导入中国水仙，期望能获得转基冈植 株，为提高中国水仙的品质提供一条有效的途径。 以福建漳州水仙鳞茎盘组织切块为外植体，研究了低温预处理、 不同植物生长调节剂对水仙小鳞茎诱导及再生、继代培养、生根及移 栽的影响，建立了一套高频的中国水仙再生体系。在此基础上，以GUS 基因为报告基阏，通过根癌农杆菌介导，对农杆菌转化中国水仙的各 项影响因素进行了详细研究，进行了抗生素基础抗性测定和抑菌剂的 抑菌效果实验；比较了农杆菌菌株及共培养天数、农杆菌菌液浓度、 预培养天数、AS添加浓度对GUS基因瞬时表达率的影响，建立和优化 了遗传转化各环节的技术参数，为进行中国水仙的遗传操作奠定了基 础。依照该体系，采用农杆菌介导法将人乳铁蛋白基因导入中国水仙 中，经卡那霉素筛选；fnPCn检测，初步确定获得2株转基因植株。 关键词：中国水仙人乳铁蛋白基因遗传转化根癌农杆菌 Abstract famousflowers Narcissustazettavar．chinensisoneoftheChinesetraditional with economicandomamentalvalue．Butitscommercial hasbeen great production newcultivarsof affectedseriousvirusdiseases．Anditishardtobreed greatly by Narcissussexual sinceitis the of hybridization plant．Withdevelopment by triploid thefocusofthe hasbecome biotechnology,geneticengineeringtechnology ornamental this aimedat a plantbreeding．Instudy,we establishinghigh—frequency anda transformationofNarcissuslazeIla，based regenerationsystem genetic system onwhich^LF0withantimicrobiaIandantiviralfunctioncouldbetransformedinto Narcissusmediated tazetta byAgrobacteriumtumefaciens． A forNarcissuslazettavat．chinens血was regenerationsystem high-frequency of