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磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
0.01M PBS?PBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)
PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml?蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。保存于4冰箱中即可。需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制:?0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4,?81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可,如:0.1M PB(PH=7.4) :取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。?若需要 NaCl的话,加入 NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方 :pH?????? 0.2M NaH2PO4(ml)???????? 0.2M Na2HPO4(ml)5.7??? ???????? 93.5????????????????????????? 6.55.8?????????????92?????????????????????????????8????????????5.9???????????? 90?????????????????????????????106.0???????????? 87.7????????????????????????? 12.36.1???????????? 85???????????????????????????? 156.2?????????????81.5????????????????????????? 18.56.3?????????????77.5????????????????????????? 22.56.4???????????? 73.5???????????????????????? ?26.56.5???????????? 68.5???????????????????????? ?31.56.6???????????? 62.5???????????????????????? ?37.56.7???????????? 56.5???????????????????????? ?43.56.8???????????? 51?????????????????????????? ?496.9????????????? 45???????????????????????????557.0????????????? 38???????????????????????????627.1????????????? 33?????????????????????????? 677.2???????????? 28??????????????????????????? 727.3????????????? 23???????????????????????????777.4????????????? 19ml??????????????????????? ?81ml7.5????????????? 16???????????????????????????847.6????????????? 13???????????????????????????877.7???????????? 10.5??????????????????????????90.57.8????????????? 8.5???????????????????????? ?91.57.9?
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