项目脂类的测定罗紫哥特里法.pptVIP

学习目标 知识目标： 1.会说出罗紫哥特里法测脂肪原理； 2.会说出罗紫哥特里法操作过程及注意事项； 3.能说出罗紫哥特里法中各种试剂的作用； 技能目标： 1.会熟练操作抽脂瓶测定脂肪； 2.能正确的进行样品的预处理操作； 3.会碱法水解乳脂肪、回收溶剂、恒重等操作； 4.能区别牛乳脂肪测定的两种方法； 5.能根据正确评价食品中脂肪含量是否符合标准。 素质目标： 1.培养学生严谨、务实的学习精神； 2.培养学生开拓创新、团结协作的职业素质。 检测依据 GB 5413.3-2010 1 罗紫哥特里法 2 盖勃氏法 适用于适用于巴氏杀菌乳、灭菌乳、生乳、发酵乳、调制乳、 乳粉、炼乳、奶油、稀奶油、干酪和婴幼儿配方食品中脂肪的测定。 适用于巴氏杀菌乳、灭菌乳、生乳中 脂肪的测定 1、两种方法的区别 罗紫-哥特里法和巴布科克氏法都是测定乳中脂肪含量的方法。 测定牛乳中脂肪含量主要是使包裹脂肪的酪蛋白钙盐转变为可溶性的盐. 罗紫-哥特里法是利用氨水使酪蛋白钙盐转变为可溶性的盐; 巴布科克氏法是利用浓硫酸使酪蛋白钙盐转变为可溶性的盐; 基础知识 2、测定意义 （1）脂肪是牛乳中的重要营养指标。3.4% （2）生鲜牛乳分级重要指标，如特级≥ 3.2%；一级≥ 3.0%；二级≥ 2.8% 3、脂肪在液态乳中分布情况 牛乳中的脂肪周围有一层膜（主要成分是酪蛋白钙盐），这层膜是可溶性的，从而使脂肪球得以在乳中保持乳浊液稳定状态。 水解：利用氨-乙醇溶液破坏乳的胶体性状及脂肪球膜，使非脂成分溶解于氨-乙醇溶液中，而脂肪游离出来， 提取：用乙醚—石油醚抽提样品的碱水解液， 回收溶剂：通过蒸馏或蒸发去除溶剂， 烘干恒重：测定溶于溶剂中的抽提物的质量，即为乳脂肪。 测定原理 任务一：仪器设备及试剂的准备 仪器设备：抽脂瓶、10mL移液管、2mL移液管、水浴锅、20mL量筒、滴管、恒重烧瓶、电子天平、恒温干燥箱 试剂及作用： 氨水——使酪蛋白钙盐变成可溶解的盐。 乙醇——使溶解于氨水的蛋白质沉淀析出。 乙醚——提取脂肪 石油醚——降低乙醚的极性，使乙醚与水不混溶，只抽出脂肪，并使分层清晰。 抽脂瓶 任务三：成分分析 氨－乙醇处理：加2mL氨水，混匀放入65℃±5℃水浴中，加热15～20min，不时振荡，冷却至室温，静止30 s，加10 mL乙醇，缓和但彻底混合，可加2d刚果红 乙醚－石油醚提取 回收溶剂、烘干（102 ℃±2 ℃，2h）恒重 样品：全脂乳 1g， 脱脂乳1.5g，加10ml 60℃水； 液体试样10.00ml，加入抽脂瓶中 加入 25 mL乙醚， 塞上瓶塞，振摇 加入 25 mL石油醚， 塞上瓶塞，振摇 静置分层 将上层液尽可能地倒入 已恒重的脂肪收集瓶中， 避免倒出水层 将上层液尽可能地倒入已准备好的加入沸石的脂肪收集瓶中，避免倒出水层（见图4-4-2） 向抽脂瓶中加入 5mL乙醇，混匀 重复以上提取步骤， 进行第二次、第三次抽提 合并三次提取液 2、回收乙醚-石油醚 用索氏抽提装置→蒸馏回收乙醚+石油醚 3、脂肪干燥恒重 置接收瓶于恒温干燥箱（100℃/1h）→冷却→称量→再置烧瓶于恒温干燥箱（100℃/0.5h）→冷却→称量m1→重复以上操作至恒重（前后两次质量差＜0.5mg） 任务四：数据记录与计算 脂肪含量X= 项目名称 样品名称 接样日期 设备 检验日期 检验依据 GB 5413.3-2010（第一法） 接收瓶标记 接收瓶干燥时间 接收瓶重m2（g） 干燥温度 样品质量m（g） 样品干燥时间 瓶+样品干燥后的质量m1（g） 空白接收瓶标记 接收瓶干燥时间 空白接收瓶重m4（g） 空白干燥时间 瓶+空白干燥后的质量m3（g） 计算公式 （g/100g） 脂肪（g/100g） 平均（g/100g） 本次实验分析结果的精密度 有效数字： 计算结果保留三位有效数字 精密度： 在独立条件下获得的两次独立测定结果之差应符合： 脂肪含量≥15 g/100g ，≤0.3 g/100g 脂肪含量 5~15 g/100g ，≤0.2 g/100g 脂肪含量≤ 5 g/100g ，≤0.1 g/100g 脂肪含量= （g/100g） 任务五：填写检验报告单 样品名称 产品批号 样品数量 代表数量 生产日期 检验日期 报告日期 检测依据 序号 检验项目 单位 实测结果 标准要求 单项结论 判定依据 检验结论 检验员 复核人 备注 1、样品的预处理方法 （1）巴氏杀菌乳、灭菌乳、生乳、发酵乳、调制乳：称取充分混匀试样10 g（精确至 0.0001 g）于抽脂瓶中。 （2）乳粉和乳基婴幼儿食品：称取混匀后的试样，高脂乳粉