鼠源成纤维细胞生长因子鄄21 对脂肪细胞糖代谢的作用.pdf

生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biop hys ics 2009, 36(2): 157~ 164 鼠源成纤维细胞生长因子 对 21 脂肪细胞糖代谢的作用* 1)** 1)** 1) 1) 2) 1)*** 姜媛媛 刘铭瑶 任桂萍 王文飞 刘晓民 李德山 1) 2) ( 北农业大学生命科学学院生物制药教研室，哈尔滨 150030； 哈尔滨医科大学第一附属医院内分泌科，哈尔滨 15000 1) 摘要 成纤维细胞生长因子-21(FGF-2 1)是FGF 家族的成员之一 近年发现FGF-21 是一种新的代谢调节因子 从小鼠肝脏 克隆FGF-2 1 cDNA ，经测序正确后亚克隆至具有羟胺切割位点的小泛素相关修饰物表达载体上，转化宿主菌Rosetta ，得到 的转化子经IPTG 诱导后 得稳定、高效、可溶的表达产物 表达产物经羟胺切割、透析、复性、柱层析纯化后，在每升宿 主菌中可 得4 mg 纯度为95% 的成熟鼠源FGF-21 蛋白，利用葡萄糖氧化酶- 过氧化物酶(POD-GOD)法在小鼠3T3-L1 脂肪 细胞中进行生物学活性检测 结果表明，鼠源FGF-21 具有促进脂肪细胞吸收葡萄糖的作用，短期作用(1 h)与胰岛素相似， 长期作用(8 和 12 h) 明显优于胰岛素 这一结果为以鼠源FGF-21 为模型进一步研究FGF-21 的生物学活性及其在糖代谢方面 的作用机理奠定了基础 关键词 成纤维细胞生长因子-21 ，糖尿病，糖代谢，3T3-L1 学科分类号 Q7 DOI: 10.3724/SP.J.1206.2008.00311 糖尿病是一种常见的代谢疾病，目前我国糖尿 的FGF 家族中的一员，主要在肝脏中表达，脂肪 [l] [9] 一些动物实验表明，它 病患者已达4 000 万左右 ，其患病率在过去20 年 组织可能是其作用靶点 [2] [10] 中上升了4 倍，并呈现日益加速的态势 .糖尿病慢 可以不依赖胰岛素调节血糖 ，改善2 型糖尿病患 性并发症及其终点事件具有明显致死致残的特点， 者的胰岛素抵抗，大剂量用药也不会导致低血糖的 [11] 已成为危害人类健康和生命的重要杀手，严重危害 发生 ，对一些组织细胞的脂类代谢也有调节作 人们的健康[3, 4] 因此如何更有效地控制血糖、防 用 因此，FGF-21 有很大潜力成为治疗2 型糖尿 止糖尿病并发症的发生发展，已成为糖尿病治疗中 病的新型药物 FGF-21 是FGF 家族的新成员，目 [5] 的热点和难点问题 前人们对其了解还很少，其在生理和病理情况下 糖尿病患者中2 型糖尿病患者占80% 以上，2 的作用机理也不十分清楚 迄今世界上对鼠源 型糖尿病是一种缓慢进展性疾病，其发病的生理基 FGF-21 功能研究方面的报道很少，本研究从小鼠 础是胰岛素抵抗和 细胞功能受损，持续高血糖 肝脏中成功地克隆出FGF-21cDNA，在原核细胞中 可损害胰岛 细胞功能及外周组织对胰岛素的敏 得大量、稳定表达，并通过