重组pedv-s 干酪乳杆菌的构建及其表达 - 黑龙江八一农垦大学.pdf

第 28 卷 第 2 期 黑 龙 江 八 一 农 垦 大 学 学 报 28（2 ）：76~79 第 28 卷 20 16 年 4 月 Journal of Heilongjiang Bayi Agricultural University Apr. 20 16 黑 龙 江 八 一 农 垦 大 学 学 报 doi:10.3969/j .issn.1002-2090.20 16.02.0 15 重组 PEDV-S 干酪乳杆菌的构建及其表达 岳璐 1 ，李昆鹏 1 ，侯喜林 2 ，余丽芸 1，2 （1.黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院，大庆 163319 ；2.黑龙江八一农垦大学动物科技学院） 摘 要 ：猪流行性腹泻病毒（PEDV ）可引起猪 的呕吐、腹泻及脱水 。 通过将其 S1 片段逆转录连接到干酪乳杆菌表面表达载体 pLA 上 ，使 其 表 达 蛋 白 ，为 进 一 步 研 究 其 特 性 及 免 疫 原 性 奠 定 基 础 。 采 用 TRIzol 的方 法 从 PEDV 中提 取 RNA 为 模 板 ， 通 过 RT - PCR 技术获得该病毒的 S1 片段 ， 然后将该基 因连接到载体 pLA 中并表达 。 重组菌经过培养表达之后 ， 利用 Western blot 检测融合蛋 白大小约为 81 kDa ；重组蛋 白可被兔源的抗 PgsA 血清和鼠源的抗 PEDV 血清所识别 。 表 明重组干酪 乳杆菌成功的表达了融合蛋 白。 关键词 ：猪流行性腹泻病毒 ；干酪乳杆菌 ；RT-PCR 技术 ；Western blot 技术 中图分类号 ：S482 文献标识码 ：A 文章编号 ：1002-2090（20 16 ）02-0076-04 Cloning and Expression of PEDV-S on Lactobacillus casei 1 1 2 1，2 Yue Lu ，Li Kunpeng ，Hou Xilin ，Yu Liyun （1. College of Life Science and Technology ，Heilongjiang Bayi Agricultural University ，Daqing 163319 ； 2. College of Animal Science and Technology ，Heilongjiang Bayi Agricultural University ） Abstract:Porcine epidemic diarrhea （PEDV ）can cause vomit ，diarrhea and dehydration. The gene fragments encoding PEDV S1 protein was cloned into Lactobacillus casei surface expression vector pLA to express the protein ，which laid the foundation for further study of characteristics and immunogenicity. B