酪蛋白水解物的类蛋白反应修饰产物的分离纯化及其抗 - 现代食品科技.pdf

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2017, Vol.33, No.5 酪蛋白水解物的类蛋白反应修饰产物的分离纯化及 其抗氧化活性研究 戚莉佳 1 1 1 1 2 ，庞佳楠 ，马春敏 ，陈芳芳 ，李铁晶 （1.东北农业大学乳品科学教育部重点实验室，黑龙江哈尔滨 150030）（2.辽宁大学轻工学院,辽宁沈阳 110000） 摘要：本文采用木瓜蛋白酶在pH 6.5 的条件下对酪蛋白进行水解2 h ，水解产物测得DPPH 35.89%±0.13% ，超氧阴离子清除能 力为 21.39%±0.33% ，还原能力为 53.00%±2.00%。分别导入 Tyr、Phe 和 Try 对水解产物进行修饰，结果表明类蛋白反应时间为 6 h 时，三种产物的抗氧化性最高，其中Try 修饰产物抗氧化性最好，测得 DPPH、超氧阴离子清除能力、还原能力分别46.84%±1.16% 、 34.10%±0.32%、70.00%±2% （p 0.05 ）。随后，将Try 修饰下的产物进行分离纯化，使用装有 G-15 葡聚糖凝胶的色谱柱，水为洗脱液， 上样浓度为 20 mg/mL ，流速为0.5 mL/min，洗脱效果最佳，得到三个峰，分别测定其抗氧化性，结果表明峰二的抗氧化性最好，测 得 DPPH、超氧阴离子清除能力、还原能力分别为 58.46%±0.57%、38.42%±0.47%和 80.00%±0.02% （p 0.05 ）。将峰二产物通过液相 色谱进一步分离鉴定，得到单一峰，证明蛋白纯化下的产物纯度较高。最后，得到了高纯度的抗氧化肽。 关键词：抗氧化活性；酪蛋白水解；类蛋白反应；分离纯化 文章篇号：1673-9078(2017)5-91-96 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2017.5.015 Separation and Purification of Modified Casein Hydrolysates Using Plastein Reaction and Their Antioxidant Activities 1 1 1 1 2 QI Li-jia , PANG Jia-nan , MA Chun-min , CHEN Fang-fang , LI Tie-jing (1.Key Lab of Dairy Science, Ministry of Education, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China) (2.College of Light Industry, Liaoning University, Shenyang 110000, China) Abstract: Casein was hydrolyzed with papain at pH 6.5 for two hours, and the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) scavenging capacity, superoxide anion scavenging capacity, and reducing power of the hydrolysis product (CH) were measured a