卵巢癌患者化疗后末梢血白细胞减少与细胞凋亡的相关性分析.pdfVIP

中文 摘要 目 的 由于卵巢癌早期难于发现，术后化疗是其重要的辅助治疗方 法。然而，由于化疗药物的非选择性组织杀伤引起的骨髓抑制而 导致的末梢血白细胞减少，已经成为限制化疗剂量和按期进行规 范性化疗的重要障碍，研究已证实卵巢癌的常规化疗方案中的顺 铂及环磷酰胺能在多种肿瘤组织中诱导凋亡。因此，本研究以卵 巢癌患者化疗病人为研究对象，通过研究患者化疗前后外周血白 细胞的减少与细胞凋亡的相关性，探讨细胞凋亡检测对于早期预 测白细胞减少的可能性。 厂 l对象与方法 对象： 研究对象为25位因卵巢癌接受手术治疗、术后进行化疗的患 者。患者在化疗前接受系统性全身检查，除外影响白细胞数量的 病理性疾患，确认白细胞总数、分数均在正常范围后开始化疗。化 疗方案为cP方案。化疗前或化疗过程中由于白细胞的急剧减少 而服用升白细胞药物的患者已从本研究中剔除。 方法： 1．外周血白细胞总数、分数计数： 患者空腹状态采血，肝素化外周血白细胞总数及分数由血液 检测实验室机器计数后，与人工计数相符合者为入选标准。 2．外周血自细胞的分离与纯化： 患者于化疗前24小时内及化疗第5天立即采取静脉血2ml， 采用肝素(100u／m1)抗凝，37℃孵育2小时后采用低张溶血素溶 ．1． 勰破坏绞细骢。PBS(PH 7．4)洗涤2次，所褥戎分中含蠢97％浚 上白细胞，其中95％为中性粒细胞。采用台盼蓝排除试验确定细 脆活性大予98％。 3．细胞凋亡的检测： ④流式缨脆仅(FCM)定量分楞篪亡核(subGl翌二结俸)： 凋亡细胞核的百分比采用DNA荧光赢方图上亚二倍体峰值 计数。 ②琼脂糖凝胶电泳检测DNA双链断裂片段定性分析凋亡细 胞 采用2％琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段。 4。统计分析： 结果表达采用均值加减标准菱，统计分析采用双侧配对t检 验，采髑直线黼归福关分街爨缓藏减少与满亡细耱增热之阕酶穗 关性，P0．05为有统计学意义。采用I临床流行病学方法分析凋 亡的检溺用于预测鑫缁施减少的敏感性。 结 栗 1．佬疗前后末稍盎自缬脆总数及调亡的变纯：患者纯疗屠自 细胞减少，凋亡增加。患者化疗前及化疗第5天末梢静脉血白细 数分别为4．01±2．59％和5．66±1．36％，与化疗前比较，化疗后 末梢静脉血白缁胞数量减少及孺亡的百分毙增娜均具有显著往 (P0．05)。 2．琼脂糖凝胶电泳检测DNA双链断裂方法定性检测细胞凋 亡，证实了DNA双链断裂出现。 3．化疗前后末梢血自缁胞总数与细胞凋亡变化的糯关性：化 疗前后末捎媳自细胞总数与细胞凋亡变化的相关系数R=0．65 ·2· (P0．05)。 4。使用临床流行病学分析方法检测细胞凋亡作为白细胞减 少的早期诊断法的敏感性：灵敏度为82％，特异度为75％，准确度 为80％，(P0．05)o_』 { 结 论 1．化疗过程中细胞毒性药物介导的凋亡在一定程度上导致 了化疗过程中伴随的自细胞减少。 2．白细胞减少与细胞凋亡增加之间具有一定的相关性。 3．凋亡的检测有助于评价自细胞的减少。 关键词：卵巢癌；化疗；凋亡；白细胞；相关√ + f、 } ·3· The onthecorrelation study between