卵巢肿瘤组织中突变型p53表达与iNOS活性及二者相关性的分析.pdfVIP

中文摘要 前 言 卵巢恶性肿瘤是致死率最高的女性生殖道肿瘤，其发生可能 与内外环境中大量的自由基密切相关。一氧化氮(NO)是一种高 度活跃的自由基，它可致DNA发生一系列变化，导致基因突变， 诱导肿瘤发生。由于DNA的损伤野生型p53转化为突变型p53 是p53的抑癌功能丧失的原因之一，我们通过检测卵巢恶性肿瘤 组织中NO主要催化酶诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性以及突 变型p53蛋白表达来探讨自由基及肿瘤基因在肿瘤组织中变化的 意义。 材料与方法 1、材料 收集2000—2001年中国医科大学附属一院妇科病理存档标 本75例，其中因手术切除正常卵巢11例，卵巢良性肿瘤15例，恶 性肿瘤49例，根据FIGO分期标准将卵巢恶性肿瘤分为：早中期 (I、Ⅱ期)20例，晚期(Ⅲ、Ⅳ期)29例；高分化者12例，中低分化 者37例，标本均经4％甲醛固定，石蜡包埋，制成5“m厚切片。 2、实验方法 采用免疫组织化学方法检测突变型p53、iNOS蛋白的表达情 况，即用型SABC试剂盒、兔抗人p53多克隆抗体、兔抗人iNOS多 克隆抗体由武汉博士德公司提供，切片脱蜡后，按SABC免疫组化 试剂盒步骤进行。阴性对照用PBS代替一抗，每张切片随机选取 5个视野，得出每张切片iNOS、突变型p53阳性染色细胞百分率， 根据阳性染色细胞率分为3级：(1)(一)整个切片未见阳性染色或 阳性染色细胞数10％；(2)阳性(+)：阳性染色细胞数占10％一 40％；(3)强阳性(++)：／40％。统计学分析采用卡方检验及等级 秩和检验。 ． 结 果 1、免疫组织化学结果：iNOS：11例正常卵巢组织中阳性率为 18．18％，15例卵巢良性肿瘤为20．oo％，49例恶性肿瘤中为61． 22％；突变型P53正常卵巢为9．09％，卵巢良性肿瘤为13．33％， 卵巢恶性肿瘤为65．31％。经卡方检验，iNOS恶性组表达分别与 正常卵巢、良性肿瘤组进行比较差异都有显著意义(P0．05)；突 变型p53蛋白在恶性组表达分别与正常卵巢、良性肿瘤组进行比 较差异都有显著意义(P0．01)。 2．早中期及晚期卵巢恶性肿瘤中iNOS阳性表达率为50． 00％、79．31％，差别有显著意义(P0．05)。 3．卵巢恶性肿瘤高分化及中低分化组中iNOS阳性率分别为 81．08％，差别有显著意义(P0．01)。 4．卵巢恶性肿瘤中p53、iNOS均为阳性表达者为28例，均为 合计6例，符合率为87．76％，经统计分析二者呈正相关(P0． 叭)。 讨 论 NO在体内由NOS催化产生，iNOS是NOS的一种，是机体在 ·2· 肄物入侵或肿瘤发生时，经该过程产生的细胞因子诱导产生的，它 继甏缝纯薅内NO懿垒裁。薅人认为NO翡大量产兰游糯溪燕鬻 露照生长所嚣藜惹薰，并潮鬟缨熬对惫释蠢害裁激戆黪榔爨力。 溺薅，犬爨NO佟荛黎慝瓣攻击饕，捷缀稳DNA发生搀蕊，致游癌 发生及发展。对人类黼瘤中NOS含量进行的大鬣研究发现，NOS 与霆牵瓣鼢恶缝程凄鸯关。在某些翳瘸中尤端增多：魏卵熊癌、乳蓦 癌、照型胶质细胞瘤等，但这些研究未对NOS进行分型，朱熊说明 iNOS豢骅痊囊缓孛戆裘达清嚣，焉就iNOS浆产垒撬懿致罐纯凌 蠡鏊寒说，它在黪瘤缓筑串酶裘这应该是特彝篷增赢静。率褥究中 铡溺甍痰纽诧法检测剃iNOS在舞巢恶性静癯缀缀中液达上灏， 鼠随肿瘸恶性程度增瀚『『iii表达增高，搦示iNOS与卵巢肿瘸的发 生有密切关系。 零褥究还检测了觋今黪瘥旗究孛热点瀚西3搀瘗鏊嚣突变情 涎，考套iNOS蕊表达鸯必3突变之怒黪辐关关系，结暴盛示二翥 表达符合率为87。76％，璺明确正糨关，袋明肿瘤发生过稷中可能 存在iNOS表达增魏与蹦3突变之阉豹榭互作蔫关系。． 莲 论 率实验得詹馥下撩论： 1．iNOS及p53在磁常卵巢、卵巢髓性发恶性肿瘤中的表达 要递漤趋势，二者均冬