免疫亲和色谱特异性剔除中药方剂四逆散中的柚皮苷.pdf

!# 年$ 月 色 谱 $%’ !% (%’ !# !# !#$%% ’()*$+, (- !*(.+/(0*+1 2 !% ’ !%# 免疫亲和色谱特异性剔除中药方剂四逆散中的柚皮苷 陈) 亮，) 陈) 婷，) 徐) 强 （南京大学生命科学学院 医药生物技术国家重点实验室，江苏 南京 ! (- ） 摘要：为了获得剔除柚皮苷（16.13.1 ）的中药方剂四逆散样品以供其药理活性探讨时使用，制备了抗柚皮苷抗体的 免疫亲和色谱柱，用于特异性地剔除四逆散中的柚皮苷。首先合成了柚皮苷的完全抗原 柚皮苷与牛血清白蛋 白的结合物 16.13.1) 789 ，并用 16.13.1) 789 对新西兰兔进行免疫获得抗血清，再将其纯化后与经 :(76 活化的 8+;06%+ % 7 凝胶共价偶联制成免疫亲和色谱柱。将四逆散提取物样品溶液上样该色谱柱，洗脱，制得特异性剔 16.13.1) 789 被成功合成。将其用于免疫新西兰兔，获得的抗血清 除了柚皮苷的四逆散样品。由检测结果可知， 的效价经酶联免疫吸附法（,=89 ）测定达到 ( . ，抗体 3? 的纯度达 -%@ ，交叉反应率低。在 3? 与 8+;0) 6%+ % 7 合成的3?) 8+;06%+ 免疫亲和色谱柱中，3? 的偶联率为 *+@ 。用该免疫亲和色谱柱处理四逆散后，其 中所含的柚皮苷几乎完全被剔除。结果证明，利用抗柚皮苷免疫亲和色谱，能特异性地剔除四逆散或其他样品中 的柚皮苷成分。 关键词：免疫亲和色谱；柚皮苷；完全抗原；特异性剔除；四逆散 中图分类号： A#$*) ) 文献标识码：9) ) 文章编号：()*+ ( （!# ）)!%)%) ) 栏目类别：研究论文 !#$%%$ ’#(#)%*+ * ,-.%+/%+ .*0 !%1,%1!-+ ，- 2.-3%)%*+-( 45%+#6# 7.#6$.%)%*+ ，89 -+ :00;+*-%+%)9 45.*0-)*/.-59 :B,( =.13 ，:B,( *.13 ，CD E.13 （! #$ % $ ’ #()*#)* )+ , -#*. #/$0 1/#2 3 1)$/-4)2)5 ，!/-))2 )+ ’ 1+ $ !/1$4/$6 ， 7 #48 145 941:$*61 ，7 #48 145 !##$% ，;-14# ） 86).-$) ：*% ;+/.F./# G+;+2+ 20+ /%-;%51G 16.13.1 F6%- 8.) (.) 81 ， 26G.2.%1 :0.1++ ;6+/6.;2.%1 ，1 .--51%FF.1.2# /06%-2%36;0# /%5-1 H ;6+;6+G’ *0+ 16.13.1 I%J.1+ +) 65- I5-.1 （789 ）/%-;+K （16.13.1) 789 ）H #120+.L+G 2% -M+ 20+ /%-;+2+ 12.3+1 16.13.1) 789 ’ N%#/%1 12.I%G# H ;6+;6+G F6%- 20+ +65- %F 6II.2 .--51.L+G H.20 16) .13.1) 789 ’ *0+1 ，1 .--51%FF.1.2# /%5-1 H -G+ I# /%J+12# /%5;.13 20+ ;%#/%1 12.I%G# 2% :(76) /2.J2+G 8+;06%+ %