何首乌饮对衰老大鼠睾丸组织NO和iNOS含量及c-fos蛋白表达影响.pdf

中文摘要 何首乌饮对衰老大鼠睾丸组织 NO和iNOS含量及c．10s蛋白表达的影响 摘 要 随着医学及分子生物学的发展，延缓衰老成为国内外学者研究的热点 课题之一。衰老与下丘脑．垂体．性腺轴的功能有着非常密切的相关，其中 性腺起着重要调节的作用。传统医学认为肾虚是衰老的根本内因。补肾方 剂何首乌饮具有补肝肾、健脾j益精血、延年益寿的功效。本研究采用 D．半乳糖建立亚急性衰老雄性大鼠模型，探讨何首乌饮对衰老雄性大鼠睾 据，为研发临床抗衰老中药积累实验资料。 目的：观察何首乌饮对D．半乳糖所致亚急性衰老模型大鼠睾丸组织 方法： ， 2209，在河北医科大学实验动物中心购买。将大鼠随机分为：模型组(M)、 15只。除正常组外，均采用6％D．半乳糖溶液(300mg·kg-1．d一，60d)连续腹 腔注射建立亚急性衰老模型。在造模的第60d，何首乌饮延缓衰老组给予 何首乌饮4．8 乌饮预防组在腹腔注射D．半乳糖溶液的同时灌胃何首乌饮4．8g／ml (1ml／1009)。 2 标本处理 (1)用10％水合氯醛麻醉大鼠，在内眦眶后静脉采取，血约1．5ml，离 心取上清。放射免疫检测血清睾酮的含量，与正常组比较，睾酮含量下降 显著后，认为模型建立成功。 (2)每组取3只大鼠，用4％多聚甲醛液灌注固定，取睾丸组织，常规 石蜡包埋，用于免疫组织化学染色和n胍L染色。 (3)其余大鼠断头处死迅速取出双侧睾丸放入液氮中，采用生物化学方 法检测睾丸组织NO和iNOS含量，WesternBlot法检测大鼠睾丸c．fos蛋 中文摘要 白的表达情况。 结果： 1何首乌饮对睾丸组织NO和iNOS含量的影响 模型组(M组)大鼠睾丸组织NO和iNOS的含量明显升高，与正常 对照组(N组)大鼠比较差异具有统计学意义(尸O．01)；何首乌饮可以 抑制模型大鼠NO和iNOS含量的升高，预防组和延缓衰老组与模型组比 2睾丸组织用TUNEL法染色 在各组大鼠睾丸组织中均有凋亡的发生。这些凋亡细胞包括精原细胞 和初级精母细胞，存在于曲细精管近基底部，衰老组凋亡阳性率较正常组 明显升高(尸O．01)，何首乌饮用药组凋亡阳性率显著低于模型组．(P O．01)，且预防用药组好于延缓衰老组(尸O．05)。 3睾丸组织c．fos蛋白的表达 免疫组织化学染色结果显示：阳性产物定位在睾丸间质细胞、精母细 胞、精子细胞，呈棕黄色位于细胞核和细胞质内。WestemBlot法半定量 分析表明，模型组与正常组相比明显降低(尸O．01)；何首乌饮用药后均能 提高睾丸c．fos蛋白的表达(尸O．01)。何首乌饮预防与延缓衰老组无显著 性差别(尸O．05)。 结论： l何首乌饮能够降低衰老大鼠睾丸组织NO和iNOS。 2何首乌饮能够减少生精细胞的凋亡。 3何首乌饮能够明显提高衰老大鼠睾丸c．fos蛋白的表达。 关键词：何首乌饮；衰老；睾丸；细胞凋亡；c．fos；NO；iNOS 英文摘要 Effectsof onthetestisNitric Heshouwuyin Nitric and ofc--fos of Oxide SynthaseExpressionproteinaging malerats ABSTRACT the of becomesoneof with research Anti—aging developmenttechn