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未定型鸭肝炎病毒单克隆抗体的制备及初步应用分析

未定型鸭肝炎病毒单克隆抗体的制备及初步应用 中文摘要 自1999年开始在我国北京、广东、广西等地接种过I型肝炎弱毒疫苗小鸭广泛 暴发肝炎,其l|岛床特征与I型鸭肝炎类似,但应用I型鸭肝炎弱毒疫苗和高免卵黄 抗体均无明显的防治效果。本研究通过对该病病原分离和血清学比较,初步确定病 原为未定皿清型鸭肝炎病毒。 未定型鸭肝炎尿囊液毒经差速离心和不连续蔗糖/甘油密度梯度超速离心提纯 后,免疫BALB/c小鼠。取其脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,用建立完善的间接 ELISA方法筛选,有限稀释三次克隆,获得一株该病毒的杂交瘤细胞株。经鉴定该 株单抗为IgG。亚类,该杂交瘤细胞的平均染色体为98条。细胞培养上清效价及腹 水效价为l:20000和1:106,与其它病原无交叉,抗体分泌稳定。 以此单抗为基础初步建立了检测未定型鸭病毒性肝炎的夹心ELISA方法。该方 法特异性强、重复性好、敏感性高,是确诊鸭病毒性肝炎的一种快速、有效的方法。 关键词:鸭:未定型肝炎病毒;分离鉴定:单克隆抗体; 未定型鸭肝炎病毒单克隆抗体的制备及初步应用 Abstract The whichhas inoculatedthe DHV ducking been attenuated I living typevaccine, inour suchas andSO extensivelyabrupthepatitiscountry 1999itsclinicalcharacteristicissimilar tO on,since with I allthat type hepatitis,but the attenuatedDHVI live vaccineand type hyperimmune apply yolk egg antibody no haveobvious andcure the isolation preventionresult.Throughpathogenyandthe the with unformed is causedthe VlmSi’n serum,itcertainly comparison by hepatitis type the reseach. original theSP2/0 cellswi廿lthe cells By myeloma of unformed

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