未成熟卵母细胞体外培养成熟（IVM）、受精和胚胎发育的分析.pdfVIP

中文摘要 第一部分 小鼠求成熟卵母细胞的体外成熟、受精和胚胎发育 基戆 l、鼹察·眭戏熬翦小鬣熬窦鼹露海搭辨壤葵戆彩态学黢变，溺时评傍性激素及生 陡因子等添加物对窦前卵泡体外发育的影响。 2、避{亍蛙戏熬小鼠中Gv裳舞母缀熬戆钵乡}簸熬臻炎，羁眩魄较IVM鞠倦内成熟 级卵子的受精、胚胎发育情况。 材拳墨与方法 枧械法分离性成熟前小藏卵巢中的窦前卵泡和·陡成熟詹小鼠卵巢中鲍GV期 卵母细胞及刺激后的成熟卵母细胞。寞前卵泡分2组培养子20“l培养滴。1、Gn 组： a—MEM+lO％rFCS+lOOmlU／ml rFSH±ITS(5Hg／ml insulin，5}Lg／ml selenium)±lOmlU／m1rLH，第12天移入＆一MEM十1．51U／ml transferrine，5ng／ml rHCG+5ng／mt 录∽增生、饔形成簿形态学改变和卵子成熟情况。分离的Gv期卵鸯细胞则赢按 Fetuin+lO％FCS+I．5IU／ml rEGF中，16小 培养于q—MgM+lmg／ml rHCG±5ng／ml 录：i{；成熟、受精和胚胎发育情况，并与体内成熟的卵子比较。 结果 激素鳇樊祷癸遨燧长睽爨，92．92％存嚣，28，8瓣形藏窦，嬷葬14天墨40．35％ 排出成熟卵，而无激索组窦1ji『卵泡生长缓慢，生存6天后玎始萎缩、变黑，存洒 率仪10．91％，无窦卵泡形成，仅11．11％排出成熟卵，有显蒋差异(PO．Oi)。激 素维在添jj【lI‘l’s、脒后，寞蓠卵溆的窦形成率积髅出成熟鲫子率均显著上丹 熟率无明显上丹，但受精率、卵裂率均有显萋提高(PO．05)。体内成熟卵子瓣受 显低于前者，有显麓差异(PO．01)。 结论 黏附、颗粒细胞增生和卵子成熟。Gn和ITS、EGF都促进卵泡体外发育和卵堪细 稳髂羚残熬、受精犟疆籁耱发商麓力。I￥鼙疆露母缨激静受精率、郛裂率{囊予体内 成熟组，培养系统仍需改进。 关键词： 体外成熟体外培养 卵泡发育胚胎发育 繁二部分 人末成熟卵母细胞的体外培养成熟、受精、 胚胎发弯秘妊娠皴果鼹察 目 的 探索在不用或4,N量使用Gn条件下对PCO和PCOS患者的未成熟卵母细胞休 外培养至成熟、受精、卵裂和妊娠的可行性，为IVF-ET提供新的卵子来源。 材辩与方法 2002年7弱埘F 3，j≥≤募集12缀粥O和l，COS患者，其行13个蠢然或刺 激弱lWl溺羯。所有患鬈在月经第3天歹}始B越涟测舞泡发弯，Gn刺激黉奁月 rFSH+500mlU／mirHCG+IO％ 获强予分别壤奏予三萃孛不强培葬熬：f—iiTF+75mIU／ml rFSH+500mIU／ml SPS，f-HTF+7fimIU／ml rFSH+500mlU／ml rEGF，共培养25～48小时。取努当天起 rHCG+20豫hFF+2ng／mt 予E。l～2mg／d口服，受精日起予P60～80mg／d胍注，体外受精2天后宫腔内移 挺伉质的胚胎。 缭果 本研究共获卵t18个，平稳淑卵数9．83个。体外培养0CCl02个，成熟率 卵裂和优质胚胎率，FF添加EGF后卵子的成熟、受精和优质胚胎率增加，但差 雾不秘受。寮j激缀和来刺激组在辩子成熬、受精、辩爱耪优质疆狳率方霹均无显 藩差异。PCOS较PCO患者有更高获卵数，PCO患者卵子的成熟、爱精、卵裂和优 矮艇爨率麴莲子PCOS恚袭，毽秃统计学蒺异。熬培养露阉趸长，露子豹藏熬、 受精、卵裂和优质胚胎率均升高，其中正