XevoTQ-S测定猪尿液中的21种β-受体激动剂.docVIP

ACQUITY UPLC?-Xevo TQ-S同时测定猪尿液中的21种β-受体激动剂 　　今年3月，瘦肉精事件引发全国拉网式排查，瘦肉精事件闹得沸沸扬扬，10年间瘦肉精屡禁不绝，添加瘦肉精喂出来的猪不仅颜色光亮，而且可以增加猪的瘦肉率，现在人们都关注身材，不吃肥腻的肉，这也导致饮食习惯吃瘦肉，而添加瘦肉精的猪肉正好符合当今人们的饮食习惯，瘦肉精事件一出大家都在徘徊这肉还吃不吃？ 简介 瘦肉精：一类动物用药的统称，任何能够促进瘦肉生长、抑制动物脂肪生长的物质都可以叫做瘦肉精。 目前，能够实现这种功能的物质是一类叫做β-兴奋剂的药物。与传统瘦肉精盐酸克伦特罗同属肾上腺受体激动剂的莱克多巴胺等同类药物同样也能提高猪的瘦肉率。盐酸克伦特罗的检测方法主要有酶联免疫吸附法（ELISA）、胶体金免疫层析法、高效液相色谱法、气质联用法及液质联用法。国家标准GB/T 5009.192-2003 动物性食品中克伦特罗残留量的测定中规定方法为气相色谱-质谱法（GC-MS）、高效液相色谱法、酶联免疫法，其方法检出限均为0.5ug/kg。SN/T 1924-2007 进出口动物源食品中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林残留量的检测方法采用LC/MS/MS法，该方法具有高灵敏度等优点被普遍使用。本文使用UPLC/XEVO TQ-S对猪尿液中的β-受体激动剂进行分析。 实验方法 UPLC条件LC系统： ACQUITY UPLC?运行时间： 10min色谱柱： ACQUITY? BEH C18 1.7μm，2.1mm x 100mm流动相A： 0.1%甲酸水流动相B： 乙腈流速： 0.40mL/min MS条件MS系统： Xevo TQ-S离子模式： ESI+毛细管电压： 3.5kv源温度： 150℃雾化气温度： 500℃雾化气流速： 900L/hr锥孔气流速： 20 L/hrMRM条件：Quanpedia数据库 　　Quanpedia是沃特世特有的一种可扩展和可搜索的数据库，为您提供LC/MS/MS定量方法信息，目前数据库已有超过1200种化合物，包括色谱方法、质谱方法、定量方法等，您可自由选择其中的任意化合物或化合物种类自动形成您所需的方法，无需再重新进行方法开发过程。中国色谱网 下图为数据库得到的方法信息： 自动生成MRM方法： 样品制备 样品制备参照GB/T 22286-2008《动源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定》进行。 ■ 量取2.0mL猪尿液样品，加入8mL 0.2M的PH为5.2的乙酸钠缓冲液，充分混匀 ■ 加入50μLβ-Glucuronidase/aryl sulfatase混匀，于37℃水浴水解过夜 ■ 水解液振荡15min，在5000r/min条件下离心分离10min后，取4mL上清液中添加100uL 10ng/mL的内标溶液混匀，加入5mL 0.1M高氯酸混合均匀，并调节溶液PH值到1±0.3。以5000r/mim条件下离心分离10min后，移取上清液并用10M的氢氧化钠溶液调节PH值到11。 ■ 加入10mL饱和氯化钠溶液和10mL异丙醇-乙酸乙酯（6:4）混合溶液，离心分离后取有机相，在40℃水浴下用氮气将其吹干 ■ 提取残渣中加入5mL 0.2M乙酸钠缓冲液（PH5.2），超声混匀溶解残渣 ■ 样品净化（如下图所示），使用Oasis MCX（3cc/60mg）小柱 ■ 净化后的洗脱液用氮气吹干，用流动相溶解定容至1.0mL，过0.22μm滤膜，待进样分析 固相提取净化过程Oasis MCX（3cc/60mg）： 实验结果与讨论 　　本方法才用一次进样同时监测猪尿液样品中的21种β-受体激动剂进行检测，在灵敏度、分离度方面获得满意的结果。与常规的串联四极杆质谱仪不同的是，Xevo TQ-S为您提供最好的定量数据的同时，还为您提供高质量的光MS/MS信息。对猪尿液中含0.5ug/L的受体激动剂样品，启用PICs（子离子确认扫描）功能，可在不影响MRM定量的同时得到各化合物子离子扫描图，与标样子离子图进行匹配，对样品中阳性结果定性起到帮助判断的作用。 结论 本方法采用多离子反应监测（MRM）方式对21种β-受体激动剂进行检测，具有快速、准确、灵敏度高、分析周期短、适用范围广等优点。适用各类动物组织或动源性食品等的测定。 IntelliStart技术可以使得开发分析方法过程变成流线型工作流程。这意味着需要更少的时间来开发方法，大大提高工作效率。强大的Quanpedia数据库包含上千种化合物的方法，自动生成方法文件让你轻松简单快速应对各种突发事件。PICs（子离子确认扫描）功能为您提供最好的定量数据的同时，还为您提供高质量的光谱MS/MS信息，对样品中阳性结果定性起到帮助判断的作用。 关于沃特世