青枯假单胞菌拮抗微生物的筛选、鉴定及发酵条件的分析.pdfVIP

青枯假单胞菌拮抗微生物的筛选、鉴定 及发酵条件的研究 遗传学专业 硕士生冉红艳 指导教师刘世贵教授 摘 要 姜瘟病是一种由青枯假单胞菌引起的生姜毁灭性病害。长期以来，国内外对 姜瘟病的防治多从农业防治和化学防治出发，防治效果不明显，而且造成了一定 程度的环境污染。应用拮抗微生物对植物病害进行生物防治是比较理想的方法。 本研究拟从姜田土壤中分离～株拮抗放线菌，并对其进行初步研究。 用稀释分离法对成都、简阳、雅安、洪雅等地区姜田的土壤样品进行放线 筛和打孔法复筛，得到产生抑菌圈最大的菌株SR一1l。 菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌以及玉米弯孢菌、水稻纹枯病菌、玉米小斑病 菌、玉米大斑病菌、玉米圆斑病菌、枯斑拟盘多孢菌、交链孢、小麦赤霉菌等 阴性细菌以及多种病原真菌均有较强的抑制作用。对其拮抗物质进行了温度、 乎没有发生变化；经过胰蛋白酶和蛋白酶K处理后，拮抗物质对两种病原指示 菌产生的抑菌圈不变。结果表明，sR—11的拮抗物质对热、酸碱和酶都有较强的 稳定性。 结合传统的表型分类、化学分类和现代的分子分类等放线菌分类方法进行多 析及16S 波曲至螺旋形，孢子椭圆形，表面光滑。细胞壁化学组分I型，糖型C。在培养 成熟后，气丝变为灰色，可闻到浓烈的土昧。分类鉴定为放线菌目，链霉菌属。 以16S 与12个模式链霉菌株的16SrDNA序列的同源性为96．5％-98．3％。 间、接种量、培养基装量、以及碳氮源等因素对链霉菌SR一1l发酵产物抑菌活性 活性最强。碳氮源分别以葡萄糖、黄豆粉和蛋白胨最好；在此基础上通过均匀设 计法优化了发酵培养基配方。优化后的培养基配方为：蛋白胨为0．3％，黄豆粉为 0．8％，葡萄糖为2．8％，NaCl为0．50％。 筛选鉴定发酵 关键词：姜瘟青枯假单胞菌链霉菌SR-11 and fermentationof Screening，identification antagonistic organisms against SOlanacarum MajorGenetics MasterCandidate：Ran Hongyan Tutor：Prof．Liu—Shigui Abatraet bacterialwiltis a destructivediseasecaused Ginger by solanacarum(Smith)Smith．Thethediseasewas prevention against always and chemicalmeasuressince theeffectof agricultural before，but was long prevention not of c