单核细胞增生性李斯特氏菌hly基因的克隆表达.pdfVIP

· 2 · 中国奶牛 ·2008年第 11期 单核细胞增生性李斯特氏菌hly基因的克隆表达 刘海瑞．付世新。罗春海 (黑龙江八一农垦大学动物科技学院，大庆 163319) 中图分类号：Q344．13 文献标识码 ：A 文章编号：1004—4264(2008)11-0002-03 摘要：以单核细胞增多性李斯特 氏菌(ListeriaMonocytogengs，LMO)LM0—0586基因组DNA为模板，运用PCR扩增 得到片段大小为 1646bp的致病基因李氏溶血素(hly)~因，并克隆到pMD18-T载体上，构建克隆载体pMD18-T-hly。 经测序正确后，将 hlv基因克隆至表达栽体 pGEX上构建表达质粒pGEX一6P一1一hly。在 IPTG诱导下，携带pGEX一 6P一1一hlyA的EcoliBL21(DE3)高效表达分子量约为82KDa的可溶性蛋 白及包涵体形式的蛋白。为进一步研究溶 血素蛋 白的结构、功能．LMO的分子流行病学调查、诊断试剂盒的开发提供依