黄瓜黑星病菌原生质体制备的条件及再生菌株的致病性.pdfVIP

北方园艺2008(11)：173～175 ·植物保护 · 黄瓜黑星病菌原生质体制备的条件及再生菌株的致病性 王 云 帆 ，王 刚 (1．重庆科技学院化学化工学院，重庆 401331；2．河南大学 生命科学学院，河南 开封 475001) 摘 要：分别利用崩溃酶、溶壁酶、纤维素酶和蜗牛酶酶解黄瓜黑星病菌，进行原生质体的制 备试验。结果表明：4种酶均能消化该茵细胞壁，获得一定数量的原生质体；产生原生质体效率最 高的是崩溃酶，该酶在浓度为 18mg／mL时产生的原生质体数量最多，最佳酶解时间为2～3h，最 适作用温度为28℃。制备的原生质体可以再生并与原始出发菌株具有相同的致病能力。 关键词：黑星病；原生质体 ；致病性 中图分类号：S436．421．19 文献标识码 ：A 文章编号：i001--0009(2008)11一O173一O3 由瓜枝孢霉 (Cladosporium cucumerium 日1．et． 南省发现了黄瓜黑星病。 Arth．)所导致的黄瓜黑星病是一种世界性病害，其危害 国内目前仅在黑星病 的田间发病情况调查、病菌的 是毁灭性的口]。1889年 ArthurJC在美国首次报道了 生物学特性、品种抗病性鉴定以及人工接种鉴定技术等 黄瓜瓜条上受黑星病侵害的情况，并与EllisJB一起定 方面做了一些研究口]。为了从根本上防治该病害的发 名为CladosporiumcucurneriurnEllisandArthur。国内 生，拟从分子水平研究其致病机制，克隆相关致病基因。 黑星病 1959年在吉林首次报道，2O世纪 7O年代末，随 而突变体的获得是解析致病菌致病机理的有效手段，利 保护地栽培的发展，黑星病开始在我国东北地区发生， 用原生质体通过遗传转化 向病菌基因组随机插入外源 2O世纪8O年代开始流行L2]。黄瓜黑星病的疫区逐步扩 DNA，是创造真菌突变体的常用方法[4]。通过制备黄瓜 大，各地均有黄瓜黑星病发生的报道，甚至在我国的海 黑星病菌的原生质体，进而发展出有效的遗传转化体 系，有望分离出多个无毒基因和致病相关基因。该研究 第二_作者简介 ：王云帆(1981一)，女，河南安 阳人，硕士，助教 ，主要 就制备黄瓜黑星病菌原生质体的方法和原生质体再生 从事植物病害防治研究工作。E-mail：wangyunfan@yeah．net。 菌株的致病性等方面进行了探讨。 收稿 日期 ：20O8一O5—28 1 材料与方法 TheDegradatingConditionandPathwayofIsocarbophosbyBacilluslaterosporus DU Chun-mei，JINShu-chao ，FANJinga，YANGHui (1．KeyLaboratoryofMicrobiology，CollegeofLifeSdences。Heilon~iiangUniversity，Harbin，Hdlongjiang150080，China；2．BeijingEco— nomic—TechnologicalDevelopmentAreaExpefiment~School。Beijing100080，China；3．CollegeofAgriculture，HeilongjiangUniversity，Har— bin，Heilongjiang150080，China) Abstract：Thedegradatingconditionandpathwayofanisocarbophosdegradatingbacterium，BacilluslaterosporusBL-21，