蛋白纯化与sec 两种系统的连用一些生物实验室总需要做蛋白纯化 .pdf

蛋白纯化与 SEC 两种系统的连用 一些生物实验室总需要做蛋白纯化，但是同时需要做蛋白的纯化结果的监测。一般而 言纯化和监测是分两步来进行的。GPC/SEC 是一种监测分离纯化的一种手段，那么我们是 否可以把两大系统连接使用呢?答案是肯定的，下面就通过两种不同型号产品的连接来举 例实现这项功能 ！本文只是说明方法，涉及到的品牌仅供参考。 仪器配置： 1， Malvern Viscotek-270 system （or OmniFACE system） 2， GE Äkta pure systems （P900/UV900/Manual Injection system） 需要配件： 1， Malvern Viscotek 1） GPC4354 Trigger Box Conversion Kit 触发配件包 AKTA 连接方式 注意，这个配件包里面包括 GPC0293 用于 Agilent cable 和 GPC2970 用于 AKTA cable 两个触发线，九针连接方式不一样。如果连接 Äkta 的设备触发盒 子也不需要外接 5V 供电源；如果没有现成的触发盒子，我们可以用两根线来 代替，另外需要去五金店去淘宝相应激发芯片。 2） CAB0310 Cable 6 Pin mini din AKTA-UV UV 模拟信号输出线 这个配件一般 AKTA 配件箱中会配置一根，但多数情况下，实验者可以通过寻 找配件箱来找到 ； 2， 如果是新的 GE Äkta pure systems 系统，那么会配有外接模拟盒子：GE (I/O-box E9, Part NO. 29-0113-61)。 连接步骤： 第一，连接 UV 信号到 270：CAB0310 Cable 6 Pin mini din AKTA-UV 用 CAB0310 连接到 Äktas UV 检测器后面标有 0-1V模拟信号输出端，此端口是一个 6 孔输 出。我们需要的信号是 1 号和 2 号孔。注意 1 号口是高电平输出，2 号口是接地。1 号口 对应我们输出端黑色的线连接到 270 的UV-Hi 端，2 号口对应输出是红色线连接到 270 的 UV-Low 端。输出端黄色线悬空不用。我们可以通过万用表笔来测试通断哦，也可以翻开 Unicorn 泵手册来确认。 5 6 3 4 1 2 黑色 红色 (6 孔接头示意图，需要 1,2 号信号输出) 第二，连接触发段子： 1， 把触发盒子，连接线 GPC2970 分别连接到相应的位置，最后再通电。GPC2970 标有 autosampler 的一端接到 akta 设备下端 P900pump 后面的 remote 上。注意不要连 接到 UV 上或者其他 remote 口上。GPC2970 R232 九针接头的公共端连接到触发盒 子上，不用连接外接 5V 供电电源。AKTA 设备提供此 5V 电压给触发盒子，这时指 示灯为红色。输出端的黄色，黑色，红色线头分别依次连接到 270Dualdetector 后面的 INPUT(1V/F.S), Trigger-GND, Trigger-SW 位置。 注意