鼠类粪便中类固醇的荧光标记及质谱鉴定.pdfVIP

第 34 卷 分析化学 ( FENX I HUAXU E) 　研究报告 第 10期 　　　　　　 　　　　　 　　　　　　 　　　　　 2006年 10 月 Ch inese Journal of A nalytical Chem istry 1406 ～14 10 鼠类粪便中类固醇的荧光标记及质谱鉴定 4 1 4 2 陈万东 　张海峰 　郭庆君 　王贤峰 3 3 2 1, 3 索有瑞 　陈桂琛 　张洪海 　尤进茂 1 ( ) 2 ( ) 曲阜师范大学化学科学学院 , 曲阜 273165 　　 曲阜师范大学生命科学学院 , 曲阜 273 165 3 ( ) 4 ( ) 中国科学院西北高原生物研究所 , 西宁 810001 　　 济宁师范专科学校 , 济宁 272025 ( ) 摘 　要 　利用新型荧光试剂 1, 2苯并 3, 4 二氢咔唑 9乙基肼基 甲酸酯 BCEC 作柱前衍生化试剂 , 在 ( μ ) Hyp ersil BD S C18 4. 6 mm ×200 mm , 5 m 色谱柱上 ,采用梯度洗脱对皮质醇 、皮质酮 、睾酮 、孕酮 4 种类固 醇荧光衍生物进行了优化分离 。65 ℃下在乙腈溶剂中以三氯乙酸作催化剂 ,衍生反应 2 h后获得稳定的荧光 ( ) 产物 。激发和发射波长分别为 333 nm 和 390 nm 。采用大气压化学电离源 A PC I 正离子模式 , 实现了黑线姬 鼠粪便中4种类固醇化合物的定性及定量测定 。线性回归系数均在 0. 9999 以上 ,检出限为 47. 3 ～7 1. 2 fmo l。 关键词 　高效液相色谱 质谱 , 荧光检测 , 柱前衍生 , 类固醇 1　引　　言 类固醇化合物不仅能起到一定的生理调节作用 ,而且在临床上对多种疾病有着很好的疗效 。对动 物的各种胁迫作用都将引起动物体内某些类固醇分泌的改变 [ 1～4 ] 。因此 ,对该类化合物的分离分析在 生物学和临床应用上具有重要意义 。目前对该类化合物的分析主要采用放射性免疫法 [ 2 , 4 ～6 ] ,但该方法 不能实现多种类固醇的同时精确测定 。尽管采用高效液相色谱和在线的紫外检测已有报道 [ 7 ] ,但相对 低的检测灵敏度难以获得满意结果 。以前曾采用新型荧光试剂 1, 2 苯并 3, 4 二氢咔唑 9乙基肼基甲 酸酯成功地分析了多种醛类化合物 [ 8 ] 。本研究采用该试剂在三氯乙酸催化剂的存在下于乙腈溶液中 实现了 4 种类固醇类化合物的同