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猪繁殖与呼吸综合征病毒 S1 株 GP3 蛋白的原核表达与纯化 蒋文明,姜 　平 ,李玉峰 (南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 ,江苏南京 2 10095) Prokaryotic Expression of the GP3 Protein of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus S1 Strain J IAN G Wenmin g , J IAN G Ping , L I Yufeng ( Key L aboratory of A ni m al D iseases D i ag nos t ic an d I m m unol ogy , M i nis t ry of A g ricul t u re , Col leg e of Veteri nary M e d ici ne , ) N anj i ng A g ricul t ural Uni vers ity , N anj i ng 2 10095 , Chi na Abstract : The GP3 delet ed hydrop ho bic Nt er minal sequence (t GP3) of P orci ne rep rod uct i v e an d resp i ratory sy n d rom e v i r us ( PRR SV) wa s cloned into p ro karyotic exp re ssion vector p R SE T . The reco mbinant p rot ein ( Hi s) 6 GP3 wa s highly exp re ssed in E. col i BL 2 1 an d coul d amount to 4 1 % of t he tot al p rot ein s. It coul d be p urified efficient ly wit h affinit y chro mato grap hy . We st er nblot tin g analy si s showed t hat t he reco mbinant p rot ein wa s able to react wit h PRR SV p olyclonal anti serum . It can be u sed for t he f urt her inve stigation on immuno genicit y an d f unction of GP3 of PRR SV . Key words :PRR SV ; GP3 ; Pro karyotic exp re ssion 摘要 : 利用限制性酶切从重组质粒 p R SE TGP3 中得到缺失 N 端疏水序列的基因片段 t GP3 (t runcat ed GP3) 。将 t GP3 克隆至原核高效表达载体 p R SE T ,在 E. col i BL 2 1 细胞中用 IP T G 诱导表达了猪繁殖与呼吸综合征病毒 ( ) ( ) PRR SV 重组蛋 白 Hi s 6GP3 , 并用亲和层析法获得 了纯化蛋 白。West ernBlotting 结果表 明重组蛋 白可被 PRR SV 阳性血清所识别 ,从而为进一步研究 PRR SV GP3 结构蛋白的免疫特性和功能奠定了基础 。 关键词 :