阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞护骨素及 - 中国骨质疏松杂志.pdfVIP

中国骨质疏松杂志 2005年 5月第l1卷第2期 ChinJOsteoporos，May．2005Vol11，No．2 251 · 药 物 研 究 · 阿胶强骨 口服液含药血清对胎鼠成骨细胞 护骨素及护骨素配体mRNA表达的影响 沈霖 武嘉林 李蕾 夏远军 高兰 谢晶 周丕琪 杨艳萍 摘要 ：目的 研究阿胶强骨 口服液含药血清对胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL表达的影响，探讨阿 胶强骨口服液治疗骨质疏松 的分子机制。方法 3月龄Wistar大鼠 (雌雄各半)30只，随机分为 阿胶强骨口服液 ，雌激素，及生理盐水对照组，灌 胃7d后 ，制备实验组和对照组的含药血清。将 新生 SD大鼠分离的颅骨成骨细胞，制成单细胞悬液，消化传代 ，取二代培养的成骨细胞 ，制成细 胞悬液。培养细胞被分为 5组，分别加同体积药液，对照组仅加培养液，继续培养。采用MTT比 色分析、。H一胸腺嘧啶核苷 (。H—TdR)渗入法测定成骨细胞增殖，用放免法测定细胞内BGP含 量 ，RT—PCR测定胎鼠成骨细胞中OPG、RANKLmRNA的表达。结果 阿胶强骨 口服液含药血 清以剂量依赖方式促进成骨细胞的增殖 ，与对照组相比，差异显著 (PO．05)。成骨细胞 OPG基 因mRNA表达在阿胶强骨口服液含药血清 100ml／L时最强，与雌激素组比较无显著性差异 (P0 05)，且明显高于对照组 (PO．05)。成骨细胞RANKL基 因mRNA表达在 1000ml／L阿胶强骨口 服液含药血清与雌激素组比较无显著性差异 (PO05)，且明显低于对照组 (PO．05)。结论 阿胶强骨 口服液可在细胞水平上促进骨 的合成代谢及前成骨细胞的有丝分裂，分子水平上调节 OPG／RANKL表达而治疗骨质疏松。 关键词： 骨质疏松 ；骨保护素 ；骨保护素配体 ；骨钙素；阿胶强骨口服液 Effectsofcontainingdrugsbloodserumofdonkey—hidegIuereinforcingboneoralsolutiononmRNAex— pressingofOPGandOPGLinosteoblastinrats SHENLin，wUJialin，LjLei，eta1．UnionHos— pital。AffiliatedTongJiMedicalCollege，HuazhougUniversityofTechnologyandScince，Wu— han430022，China Abstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectsofcontainingdrugsbloodserum ofdonkey—hideglue reinforcingboneoralsolution (DGRBOS)onmRNA expressionofOPG andOPGL inosteoblastin ratsandexplorethemolecularmechanism oftreatingosteoporosiswithDGRBOS．Methods30Wistar ratswererandomlydividedintoDGRBOSgroup，estrogengroupandnormalcontrolgroup．Afterin— tragastricadministrationfor7days，containingdrugsserum wasprepared，Skullosteoblastwasisola— tedfrom newbornSD ratsandwasmadeintosingleeellsuspension．Theculturedosteoblastsweredi— videdinto5groups．Theexperimentalgroupsweregivenequalvolumesofdrugsserum andthecon— trolgroupwasgivenculturedfluid．TheosteoblastproliferationwasmeasuredbyantigenicMTT col— orimetricanalysisand。H —TdRpenetrationmethod．Theintra—cellularBGPcontentswereevaluated byradioimmunity．ThemRNA expressionofOPG andPANKL