乙型肝炎病毒感染及DNA甲基化.doc

乙型肝炎病毒感染及DNA甲基化【摘要】 乙型肝炎病毒可引起肝脏肿瘤、肝硬化及肝炎等疾病。其引起肿瘤发生的重要机制-DNA甲基化日益引起人们重视。本文详细介绍了近年国内外对于乙型肝炎病毒感染与基因启动子甲基化之间关联的研究,进一步阐明了乙肝的作用机制,为进一步研究及临床治疗拓宽了思路。? 【关键词】 乙型肝炎病毒;甲基化;肿瘤 ? DOI:10.3760/cma.j.issn 1673-8799.2010.11.183? 作者单位:266300山东省胶州市人民医院内五科 乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒所引起的一种肝脏疾病,主要通过输血、注射和母婴传播。本病常导致慢性感染,是严重危害我国人民健康的重要传染病。HBV属于嗜肝病毒,整合于宿主肝细胞DNA中,通过宿主的免疫应答和反应引起肝细胞的损伤和破坏。许多病理学及流行病学资料证实,乙肝与肝硬化尤其是肝癌的发生有着密切的关系,如何使正常的肝细胞转化成异常乃至肿瘤细胞是我们目前研究的热点。? 肿瘤生成主要有两大机制,一个是遗传学机制,通过DNA核苷酸序列改变而形成突变,另一个就是表遗传学机制,核苷酸序列不变而DNA突变,通过对个别核苷酸的碱基序列修饰导致基因的表达变化。其中一个重要的机制就是DNA甲基化,是表遗传学水平细胞开闭基因表达的一种重要方式。5-甲基胞嘧啶是脊椎动物中唯一的修饰碱基。在人类基因组中,甲基化CpG核苷酸分布有两种形式:一种分布于CpG岛区,常存在于基因5-端的基因调控区。另一种则散在分布。正常情况下,细胞CpG岛呈非甲基化状态,而其他散在分布的CpG二核苷酸成甲基化状态,即基因组的大部分基因的甲基化状态稳定,当其甲基化状态改变时,就会造成机体染色体不稳定或基因表达异常。启动子区域的CpG岛一般呈非甲基化状态,一旦呈现高甲基化,常导致基因转录沉寂,从而使抑癌基因、DNA修复基因丧失功能[1]。? 目前随着多组抑癌基因的发现,人们也将乙肝病毒感染和抑癌基因的异常变化、修饰联系起来,近来比较热点的抑癌基因启动子异常甲基化成为乙肝病毒影响细胞异常变化的一个重要机制[2]。? 有学者认为,乙肝病毒的感染与某些抑癌基因启动子的异常甲基化有关,不仅是在肝癌中可以观察到某些抑癌基因启动子的异常,在肝硬化、腺瘤及癌旁病变中甚至也可以观察到此种现象,而且以肿瘤最为显著,这就提示启动子异常甲基化与肿瘤的发生有着密切联系,同时这种异常甲基化与氧化应激相关[3]。负责DNA甲基化作用的酶叫作DNA甲基转移酶(DNMT),它对于维持人类染色体结构的稳定性,基因在亲代细胞间传递起着重要作用。不仅通过氧化应激,某些微卫星RNA(microRNA-152)也可以通过显著下调DNMT1表达致使抑癌基因GSTP1(glutathione S-transferase pi 1即谷胱苷肽S -转移酶P1 )和CDH1 (E-cadherin 1 即E-钙粘连素,在细胞周期调控中起重要作用)甲基化水平升高,影响其功能,导致肿瘤细胞的生成。而干预microRNA也成为干预肿瘤生成的另一途径[4]。不仅是单纯的某个抑癌基因启动子甲基化异常,有学者对多个抑癌基因在肝炎、肝癌及癌旁组织中进行研究发现,肝癌组织中CDKN2B异常甲基化的频率是肝炎对照组的2倍,其他抑癌基因APC, GSTP1, and CDKN2B显性表达的程度分别是对照组的2.2-, 2.3-, and 7.6-倍。而MYC基因的甲基化水平显著下降,此试验证实抑癌基因的异常甲基化确实与肿瘤的发生息息相关[5]。? 由于乙型肝炎病毒的感染,不仅在体内发现其可以影响抑癌基因的启动子甲基化,在体外某些学者同样发现体外细胞中类似的现象,在感染了乙型肝炎病毒的细胞系中,DNA甲基转移酶的表达明显降低,(DNMT1, DNMT2, and DNMT3),抑癌基因SUFU (Suppressor of Fused )和 TIRAP(TIR domain-containing adapter protein胞浆内含有TIR区域的接头蛋白)表达下降,而这两种基因已经明确认为与肝脏肿瘤的发生密切相关,从另一个侧面证实了乙肝对人体的作用机制[6]。? HBV引起抑癌基因甲基化可能通过如下途径:当HBV-DNA整合于宿主基因组中时,可以引起宿主某些基因的缺失、易位和基因组的不稳定。在此过程中,HBX蛋白起着重要的作用。乙型肝炎病毒(HBV)X基因及其编码的多功能蛋白HBx是乙型肝炎病毒基因转录所必需的作用因子。同时,HBx通过与宿主功能蛋白直接或间接地相互作用而调节多种蛋白的功能,参与调控多条细胞信号通路转导,激活多种转录因子,在肝细胞抗凋亡和引发肝癌的过程中起重要作用. 有学者尝试将adr亚型HBx基因片段定向