原子力显微镜及其在蛋白质研究方面的应用.PDFVIP

原子力显微镜及其在蛋白质研究方面的应用 原子力显微镜及其在蛋白质研究方面的应用 生物物理学系 张岚 原子力显微镜 （atomic force microscopy ，AFM）由G.Binnig，C.Quate 和 C.Gerber 于 1986 年发明，现已成为一种观测细胞和生物大分子形态结构的强有力的工具。AFM 具有 独特的操作方式，可在中等量级 （亚微米）上研究生物系统一般形态结构；可使细胞及生物 大分子在生理溶液的条件下成像。AFM 对生物系统的成像分析比光学显微镜具有更高的分辨 率（其横向分辨率为 2－3nm，纵向分辨率为 0.5nm）1，比电子显微镜观测所需的样品处理 更接近生理条件，比通常需要从大量光谱信号中间接推导结构信息的光谱学技术更直观，且 不需要依赖于晶体样品，十分有利于研究天然状态下的生物样品。 一、引言 被测样品之间微弱的相互作用力(原子力) 获得物质表面形貌的信息。相对于 STM，AFM 1982 年 G.Binnig 和 H.Rohrer 共同研 的生物大分子样品无需覆盖导电金属膜或 制成功了第一台扫描隧道显微镜 （scanning 3 制作金属复制物 ，可以在空气或各种溶剂 tunneling microscope，STM ），使人们首 体系中直接观测，更接近生理环境；并且可 次能够真正实时观察到单个原子在物体表 通过控制成像操作力的大小，采用合适的成 面的排列方式和与表面电子行为有关的物 像模式不引起样品分子的漂移和损坏，图像 理、化学性质。STM 的工作原理是基于量子 2 的可重复性大大提高；现场操作性好，能够 理论中的隧道效应 ，将原子线度的极细探 研究监测整个生化反应的动力学过程；载体 针和被研究样品的表面作为两个电极，当样 的选择更加简单，范围更大，可用云母片、 品的表面与探针针尖的距离非常近时(一般 玻璃片及某些生物膜等。 小于 1nm)，在外加电场作用下，电子会穿过 两个电极之间的势垒从一个电极流向另一 以STM 和AFM 为基础2,衍生出了一系列 电极，从而产生隧道效应。STM要求样品表 的 扫 描 探 针 显 微 镜 (scanning probe 面能够导电，因此只能直接观察导体和半导 microscope，SPM),有激光力显微镜(LFM)、 体的表面结构，对于非导电的物质则要求样 磁力显微镜 (MFM) 、扫描电化学显微镜 品覆盖一层导电薄膜。DNA 等生物大分子几 (SECM)、近光光学显微镜(SNOM)、弹道电子 乎都为非导体或离子性导体，需要将样品用 发射显微镜(BEEM)、扫描离子电导显微镜 薄金属层包裹或制作样品的金属复制物来 (SICM)等。 进行成像观测，因此分辨率受到限制，且制 二、AFM 的工作原理 备复杂易损坏，现场操作性差，不利于实时 跟踪观测研究对象。STM 虽然可在石墨等载 AFM