原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
实验八姐妹染色单体交换试验
实验八 姐妹染色单体交换试验 * 一、实验原理 在分裂的细胞中，每条染色体由两条姐妹染色单体组成，每条染色单体则由一个双链DNA分子构成。当细胞在加有5溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）的培养基中进行培养时，BrdU取代胸腺嘧啶脱氧核糖核苷（TdR）掺入到新复制的DNA核苷酸链中。细胞在BrdU中生长，第一个周期（DNA经过一次复制）后，每条染色体的两条姐妹染色单体的DNA双链中各有一股链含有BrdU。经过第二周期（经过两次复制）后，两条姐妹染色单体中，一条单体的DNA双链类似第一周期，为单股链含BrdU，另一条单体两股链均含BrdU。两股都含有BrdU的染色单体螺旋化程度较低，与某些染色剂的亲和力低，用Giemsa染色时着色较浅，而仅有单股含BrdU的单体着色仍较深，两条姐妹染色单体显出深浅不同的颜色，当姐妹染色单体间发生同源片段交换时，就可以根据每条染色单体夹杂着深浅不一的着色片段加以区分。 在正常情况下，第二周期细胞的每条染色体的两条单体一条被深染，另一条为浅染，当发生姐妹染色单体互换时，可在同一条染色单体上看到深浅不同的颜色。如果环境中有对染色体或DNA损伤的物质时，姐妹染色单体可发生部分部分片段互换，有毒物质毒性越高，对DNA或染色体损伤越严重，则互换的频率越高。通过与正常对照组的对比，就可对被测物质的毒性作出安全性评价。 * chromatid Brdu First duplication Second duplication Third duplication Brdu Brdu chromasome chromasome chromasome * * 三、实验用品 1、器材：水浴锅、紫外灯、温度计、擦镜纸、培养箱、离心机、离心管、培养瓶、显微镜、滴管 2、试剂：RPMI1640培养基、2×SSC缓冲液、Giemsa染液、BrdU溶液(500μg/ml)、甲醇、冰醋酸、0.075M KCl、秋水仙素溶液（12.5μg/ml）、PH6.8 PBS、 3、材料：人外周血 * 四、实验步骤 （一）外周血培养及染色体标本片制备 按常规方法采血、接种，置37℃恒温培养24h后，各加入BrdU（终浓度为10ug／ml），继续避光培养48小时后，按外周血培养及染色体标本片制备常规方法收获、制片。制好片后，自然老化1～7天。 * 作业 完成此次实验报告(包含实验原理、实验药品、实验步骤） *
文档评论（0）