nu7026对肝癌细胞放射增敏作用及机制研究 study on radiosensitization effects and mechanisms of nu7026 on hepatocellular carcinoma cells.pdfVIP

第31卷第6期 辐射研究与辐射工艺学报 V01．31，No．6 2013年12月 J．Radiat．Res．Radiat．Process． December2013 NU7026对肝癌细胞放射增敏作用及机制研究 黄波龙颖唐艳 肖方竹让蔚清周平坤 (南华大学公共卫生学院衡阳421001) 摘要为给研制新的抗癌和放射增敏药物提供理论依据，采用Westernblot检测DNA—PKcs在肝癌细胞L}J的表 达水平及NU7026对DNA—PKcs活性的影响，以彗星实验表达检测细胞DNA受损的情况，微核实验观察染 色体损伤，克隆形成实验观察对细胞株放射敏感性的影响。结果表明，DNA—PKcs在肝癌细胞中呈高表达， 长辐照后细胞的修复时间，并能明显降低放射后细胞的克隆形成率。提示NU7026对肝癌细胞有放射增敏作 用，其作用机制与抑制DNA—PKcs活性有关。 关键词NU7026，放荆增敏，DNA．PKcs，DNA修复 中图分类号R735．7，TL71 肝癌是危害居民生命健康的前3位最主要恶性 肿瘤之一…。约70％一80％的肝癌患者需要接受放射NU7026)。 治疗。肝癌恶性程度高，易转移、复发，手术切除 将辐照后12 h的3组细胞常规消化后，吹打分 的病人中约50％会出现复发或远处转移怛j。提高肿 tool·L一1 散成单个细胞，0．075 KCl液低渗离心，以 瘤对放射治疗的敏感性，提高其治疗效果，成为肿 甲醇：冰醋酸=3：1固定30min，离心，弃上清， 瘤放射治疗研究领域中的重点。本工作主要研究 加入少许固定液，混匀细胞，滴23滴于玻片上， 自然晾干，吉姆萨染色5—30min，冲洗后晾干，镜 NU7026对人肝癌细胞HepG2增殖、DNA—PKcs表 达及细胞辐射敏感性的影响，为该化合物开发成为 检。 一种有效的抗癌和辐射增敏药物提供理论依据。 1．3 Western Blot检测DNA．PKes蛋白表达 1材料与方法 次，常规消化细胞，离心后收集细胞(约1×106) 1．1 材料 于1．5mLEP管中，加入100止蛋白裂解液室温裂 肝癌细胞(HepG2)和正常肝细胞(L02)由本 解8min后，13000 r·min-1离心10min，收集上清 实验室保存，在含10％胎牛血清的DMEM 于1．5mLEP管中，-70℃保存备用。 (Dulbecco’Smodifiedmedium，Gibco公司) eagle Western 培养液中37℃、5％C02培养箱中培养。NU7026 13-actin作为内参。具体步骤：按每样本每孔100 btg (C17H15N03，吗啡啉类物质，Sigma公司)、 总蛋白量上样