针刺对MCAO大鼠侧脑室注射5-硫D-葡萄糖、环孢菌素A后微血管内皮细胞转运功能的作用.pdfVIP

+ 旦 任石 1不巨 3 七 目的 : 通过研 究针刺对 MCAO 大 鼠侧脑室注射 5一硫 D一葡萄糖 、环抱 菌素 A 后微血 管 内皮 细胞 转运 功 能 的影 响 ，探讨 针刺 是否通 过 影 响微血 管 内皮细 胞 的 Glut 一1 和 P一gp 的表达 ，减 轻缺 血后神经细胞 的损伤 ，保护缺血 脑 组织 。为针刺 治疗 脑缺 血性 疾病提供 实验及理论依据 。 方法 : 线栓法 阻断 W istar 大 鼠大脑 中动 脉制 成 局灶 性脑缺 血模 型 (MCA O )。侧 脑 室 内微量注射 Glut一1、P一gP 阻滞剂 。使 用 电针 治疗 仪在 内关穴进行刺激 ; 用 NS S 神 经体征评分法于大 鼠术后 ld 、7d 进行评分 ; 采用激 光 多普 勒血 流仪监测第 7 天大 鼠 软脑 膜微 循 环 。检测 实验 后脑 组织 谷氨 酸 、乳酸 、丙酮酸 、Ca 2+及 皮质 、海 马 、丘脑 等不 同脑 区葡萄糖 的含量 ; 石蜡切 片 ，HE 染色 ，观 察海 马神经细胞 的形态 变化 ; 运 用 免疫组化 方法对海 马 以 1 区微血 管 内皮细 胞 Glut一1、MD RI 编码 的 P一gP 进行 了研 究 。 结果 : 结果显示 针刺 可促进 MCAO 大 鼠神 经体 征 的恢 复 ; 针 刺 可 以明显 改善 MCA O 大 鼠海 马 CAI 区微循环血流量 ; 降低脑 组织 中的谷 氨 酸 、乳酸 、Ca+z及 乳酸/丙酮 酸 的 比值 ，升 高丙酮酸及 皮质 、海 马 、丘脑 等 不 同脑 区葡 萄糖 的含 量 ; 针刺 能够 增加 大 鼠 海 马 CAI 区微血 管数 目，促进神经细胞 的修 复 。免疫 组化 结果显示 ，针刺可 明显提 高 脑缺血后海 马 CAI 区微血 管 内皮细胞 G lut一1 表达 ，缓解 能量衰 竭 ;MDRI 编码 的 P一gP 针刺 后 的表 达 也 显 著 增 多 ，从 而 发 挥 其 外 排 泵 的作 用 ，保 护脑 组 织 。侧 脑 室 内注 射 Glut 一1 和 P一gp 阻滞剂 ，icv s一SDG 后针刺 组软脑 膜微 循环血流量 比 icv NS 后升 高 ， 神经体征评 分 ，丙酮酸 、乳酸 、葡 萄糖 的含量较 icv NS 后 降低 ; icv C sA 后针刺组 神 经 体 征评 分 、软脑膜 微 循 环 血_流 量 ，谷 氨 酸 、乳 酸 、Ca2+的含 量 均 比 iCv NS 后 升 高 。 结论 : 针刺 可 以改善 MCAO 大 鼠海 马 CAI 区微 循环 血 流 量 ，上调 微 血 管 内皮 细胞 GIU t-- 1 和 MDRI 编 码 的 P一gP 表 达 ，减 轻 缺 血 后 神 经 细 胞 的损伤 ; iCv s一SDG 、CsA 后 对针 刺 的效果没有确 切 的抑 制 作用 ，说 明虽然 5一SDG 、CsA 能够 阻滞 Glu t一1 和 P一gP 的功 能 ，但 对 针 刺 改善 MCAO 大 鼠缺 血脑 功 能 的恢 复无 明显抑 制 作用 ，说 明 尚不 能证 实 G lu t一1 和 P一gP 是针 刺 改善脑 缺 血 功 能 的关键 环 节 ，其 机 制 有 待 进 一 步深 入研 究 。 关键 词 针 刺 ; 内关 ; MCAO ; G lut一1; P一gP ; 海 马 ; 微循环 ; 内皮 细胞 T h e effe cts o f a cu P u n e tu r e o n th e tr a n sP o r tin g fu n ctio n o f m icro e a scu la r en d o th e liu m e ell a fter iv c s 一th io 一d 一g lu co se a n d ey c lo sP o r in A SP eeia lity :R eseare h on m ieroeircu lation of brain an d tu ln or in the field of in tegrated T C M an d