细胞破碎和DNA提取.docVIP

下载本文档

12
0
约3.23千字
约 2页
2017-07-23 发布于河南
举报
版权申诉

细胞破碎和DNA提取.doc

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

细胞破碎和DNA提取

1菌株总DNA的提取采用高盐法门提取DG一3菌株的总DNA: 将DG一3菌株划平板活化，挑单菌落接种于sml培养基中，50℃剧烈振荡培养过夜*10%接种量转接至50m1LB液体培养基培养至对数生长期末期、l20(兀叼min，离心 smin*几N洗涤菌体*离心收集菌体*悬浮于10ml的兀N中*加10m留ml溶菌酶1助l(终浓度10印留ml)，37℃水浴2h一加入20m留ml蛋白酶K助1(终浓度 1001之留ml)，再加入lml的10%SDS(终浓度1%)，50℃水浴过夜一加入1/3体积的饱和氯化钠剧烈振荡155、12000r/min，离心10min、上清用等体积的酚:氯仿抽提至两界交界处澄清，1200(川min，离心smin收集上清*加入1/10体积醋酸钠、0.6体积的异丙醇沉淀，用毛细玻璃管勾出絮状沉淀*70%乙醇洗涤，吹干叶溶于花或几R(加 RNA酶的几)中，备用。