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长春中医药大学 本科生毕业论文 孙兴申 年 级： 2009级 专 业： 药物制剂 班 级： 2 学 号： 32 二O一三年五月 蜜环菌发酵液中多糖的提取、分离、纯化及理化性质的研究 孙兴申 指 导 教 师： 焦连庆 实 习 单 位： 吉林省中医药科学院 论文提交日期： 论文答辩日期： 答辩组组长： 答辩组成员： 长春中医药大学药学院本科生毕业论文 诚信承诺书 毕业论文题目 蜜环菌发酵液中多糖的提取、分离、纯化及理化性质的研究 学生姓名 孙兴申 年级 2009级 专业、班级 药物制剂2班 学号 32 学生承诺： 我承诺在毕业设计（论文）工作中遵守学校有关规定，恪守学术规范，在本人的毕业设计（论文）中未剽窃、抄袭他人的学术观点、思想和成果，未篡改实验数据，如有违规行为发生，我愿承担一切责任，接收学校的处理。 学生（签名）： 年 月 日 蜜环菌发酵液中多糖的提取、分离、纯化及理化性质的研究 目 录 摘 要 2 第一章 绪论 4 1.1多糖的化学研究 4 1.1.1多糖的提取分离与纯化 4 1.1.2 多糖的理化性质 5 第二章 蜜环菌多糖的提取分离纯化及理化性质研究 6 2.1 实验材料、试剂及仪器 6 2.2 实验部分 7 2.2.1蜜环菌多糖的提取工艺优化 2.2.2蜜环菌多糖的分离研究 8 2.2.3蜜环菌均一多糖分离纯化研究 10 2.2.4蜜环菌均一多糖的理化性质研究 12 第三章 讨论 14 3.1 分离纯化的方法选择 14 3.2 PMP试剂的选择 15 3.3 高效液相色谱条件的选择 15 参考文献 15 附录 17 致 谢 23 摘要 蜜环菌[Armillaria mellea (Vahl ex Fr. ) Quél]属于口磨科(Tricholomataceae)蜜环菌属[Armillaria(Fr.)Staude.]，药食两用真菌。蜜环菌多糖具有抗辐射、促进造血、抑制肿瘤生长、调节免疫等功能[1-6]。蜜环菌化学成分的研究主要集中在子实体、菌索、菌丝体等方面，而对于发酵液则研究较少。为了发掘蜜环菌的有效成分，进一步阐述蜜环菌多糖的药用价值，充分利用蜜环菌多糖资源，本研究从蜜环菌发酵液中提取分离、纯化多糖，获得均一多糖，研究其结构，为进一步研究和利用蜜环菌发酵液奠定实验基础。 主要的研究内容总结如下： 1、对蜜环菌发酵液中多糖的提取工艺进行了优化，以蜜环菌多糖的提取率为衡量指标。采用正交试验法进行优化选择。最佳提取工艺为：蜜环菌发酵液与水以1∶3的比例进行混合，搅拌提取3次，每次6 h。 2、采用乙醇沉淀法对蜜环菌多糖进行分离，确定适宜的醇沉浓度，获得蜜环菌发酵液中的粗多糖。 3、对上述粗多糖采用进行进一步的分级分离，采用葡聚糖凝胶柱色谱法对粗多糖 B进行分离，得到三种均一多糖，分别是AMFP-Ⅰ、AMFP-Ⅱ和AMFP-Ⅲ；分子量、分子量分布及纯度检查采用HPLC法，应用多糖专用GPC软件处理数据，单糖组成采用PMP柱前衍生化法测定，三种均一多糖均主要由Man、Rha、GalUA、Glc、Gal、Xyl 六种单糖组成。 关键词：蜜环菌发酵液，提取、分离纯化，均一多糖， Abstract [Armillaria mellea (Vahl ex Fr.) Quél] is a kind of famous medicinal and edible Fungus Belonging to [Armillaria(Fr.)Staud.], Tricholomataceae. Many functions were found in Armillaria mellea polysaccharide such as radioprotective effects, promoting hematopoietic, inhibition of tumor growth and regulation of immune function. Studies of Armillaria mellea chemical Constituents were centralized on fruiting body, rhizomorph, mycelium, etc. there were a few researches on broth. In order to discover the effective Compone- Nts of Armi