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* * * * * * * * * * * * * * * * 推测的THC代谢途径 * 菌株脱硫基因克隆 根据已经发表的红平红球菌IGTS8的脱硫基因序列，设计引物，进行PCR扩增获得了脱硫基因。 将脱硫基因连接到T载体上，在大肠杆菌宿主进行表达，结果表明菌株可以利用DBT为唯一硫源进行生长，并能够脱除其中的硫生成2-HBP。同时表明不和X7B菌株一样，没有生成2-MBP。证明甲基化的性状是和另外的酶相关。 * 菌株脱硫基因克隆 根据脱硫基因测序结果，在NCBI检索DszC酶的同原性序列并进行了分析，结果如图。Arensforf等（2002，68(2):691-698, Appl. Environ. Microbiol.）报道，通过定向进化技术，筛选获得一株菌株，可以作用于5M－BT，基因测序结果表明，因为一个碱基由G变成T，导致 DszC的261位氨基酸突变（V261F ）。 * * * DszC酶的系统进化树 * 下一步，计划分别克隆表达DszA，B，C酶。准备使用pET表达型载体，并使用镍柱进行亲和纯化。 * 高密度培养脱硫催化剂进行燃油生物脱硫试验 高密度培养脱硫催化剂 进行柴油脱硫试验 进行汽油脱硫试验 * (I)高密度生长和酶诱导二步式工艺：即解除培养中的硫源限制，先用廉价的无机硫酸盐代替有机硫，采用pH、碳源等最优控制技术，使菌体生长产量达到最大(高密度菌体生长)，再用少量的有机硫诱导菌体以制备酶源。 (II)高密度生长和酶诱导一步式工艺：用少量的有机硫作为酶系产生的诱导物，用无机硫作为非限制性硫源高密度生产菌体和过量生产该脱硫催化剂。 Biostat B2 pO2 (%) time(h) Biostat UD50 MFCS Control bfxhgf xc hg f 生物脱有机硫催化剂优化生产 * 高浓度脱硫细胞培养优化 不同碳源对菌株生长的影响 * 高浓度脱硫细胞培养优化 不同的浓度甘油对生长的影响 * 高浓度脱硫细胞培养优化 不同的氮源浓度对生长的影响 * 高浓度脱硫细胞培养优化 pH值恒定流加碳源菌体生长及在线检测参数曲线 * 处理柴油（535 ppm）含硫化合物检测 X7B休止细胞作用于柴油后，GC-AED检测含硫化合物变化。 535 ppm 72 ppm * 柴油（ 535 ppm ）中烷烃变化情况 GC-FID检测柴油经过生物催化剂处理前后烷烃变化， 图中显示烷烃为C12-C25。 * BDS汽油脱硫优点 投资成本比HDS低50％，操作成本低15-25％ 使用BDS不会降解汽油中的辛烷 BDS不需要高温高压，可以减少能源消耗 不产生H2S等副产品 HDS促使汽油中的一些烯烃饱和，从而降低汽油的辛烷值 * 汽油脱硫前后含硫有机化合物的变化 * 汽油脱硫前后烃类物质变化情况 脱前 脱后 * 4. 实际应用情况 BDS可广泛用于处理汽油、馏分油、催化裂解原料油、渣油。 采用EBC新技术，还可以生产高价值化学品，增加脱硫的经济效益。 休斯顿能源生物公司（EBC）自从1992年买断了IGT的脱硫技术以来，约投资了5,500万美元用于研究，使生物脱硫技术有了长足的发展。 * BDS脱硫流程图 * 转化BDS过程中间物获得有价值的中间物 * 4. 实际应用情况 目前EBC正在进行着原油和汽油的BDS技术研究。汽油BDS工艺预计在4-6年后实现工业化，目标是将汽油产品的硫含量降低到50 pm以下。 EBC已向Petro Star公司转让了BDS技术，将在阿拉斯加州Valdez炼油厂建成250 kt/d的BDS装置。这将是第一套工业化规模的柴油BDS装置，处理量为795 m3/d柴油，同时可产生新型芳香磺酸盐产品。 * 谢谢 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 提纲 生物脱硫的意义和背景 微生物脱硫的途径 我们的研究进展 生物脱硫的实际应用 * 1. 生物脱硫背景 环境问题已成为影响人类生存的重大问题，化石燃料煤和石油中所含有的硫是环境的主要污染源之一。 微生物脱硫操作简单，成本低。 脱有机硫是一个世界性难题，已受到广泛关注。 * 化石燃料煤和石油中所含有的有机硫和无机硫是环境的重要污染源 严重性 1998年我国有一半以上城市降水pH低于5.6。华中地区酸雨出现频率大于70%，降水的年均pH低于5.0，酸雨面积占国土面积的30%，是继欧洲、北美后世界第三大中酸雨区。 迫切性 随着能源危机的逐步加剧，开采高硫化石燃料成为必然。高硫化石燃料必须预先经过脱硫处理才能进一步使用。 * 煤炭的化学结构模型 * 石油大分子的放大结构图 * 有机硫类型 有机硫化物包括硫醇、硫化物及含硫的杂环化合物如噻吩等，共分为13类,包括