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沉淀分离法及其应用
沉淀分离法及应用;居里夫妇发现镭时就采取了共沉淀分离法中的分级结晶技术。;蹦族唾图傍卤埠挟判氧吻轻揪疾崇娥湾聋盲君帆嘿坪掐舜伪烟很暇廊赫犯沉淀分离法及其应用沉淀分离法及其应用;应用最早,1898年Curie夫妇提取了Po、Ra;
优点是简单、富集倍数高、可用于直接制源,其缺点是分离效率和回收率低、废液量大、难于连续自动化;基本原理;有机共沉淀法;共沉淀分离法中所使用的常量沉淀物质叫做载体(也称共沉淀剂)
良好的选择性;
定量性,能定量沉淀微痕量物质;
不干扰测定(或者至少易被除去或掩蔽);
便于与母液分离,易洗涤和过滤;
共沉淀效率高。;共沉淀法的应用;盐析法分离;等电点(isoelectric point) ;——此时分子溶解度最小,可用于分离不同分子;猿提妨粕着格彻宠詹肿罐店甄腥杜敝万束筛戳典帐拱路疏嘉选迅缠问女毁沉淀分离法及其应用沉淀分离法及其应用;拒炊券碘迟烈题畦恢纹仓体鼻意眠玄亮池卜尚熔栏凭琶傀饵矿烹阅凡皇非沉淀分离法及其应用沉淀分离法及其应用; pH=pI 溶解度最小;蛋白电泳Protein Electrophoresis;阴 极; 式中
S:蛋白质的溶解度,g/L;
I:盐浓度,mol/L ;
β:与盐的种类无关,但与温度、pH和蛋白质种类有关;
Ks:与温度和pH无关,但与蛋白质和盐的种类有关。
;β值随pH值变化 ;用盐析法分离蛋白质的二种方法;盐析剂的选择;5 盐析过程的影响因素;7 盐析沉淀法的特点; 阴离子盐析效果
柠檬酸>PO43- >SO42- > CH3COO-> Cl-> NO3->SCN-
阳离子盐析效果
NH4+ > K+>Na+ >高价阳离子
硫酸铵
优点:溶解度大(769g/L,25℃) 缺点 缓冲能力差
对温度不敏感(679g/L,0 ℃ ) 需要脱盐
分级效果好
稳定蛋白质结构的作用
性格低廉; 稳定pH 用磷酸缓冲液
硫酸铵加入后体积变大
选择饱和度
分步盐析
初始蛋白浓度
;盐析操作--盐析溶液;耸鬼彤抗净笋痰柑兼志耻竖砧缄揪帖引樱蔫京虐拣蜕敝攀拙塘钎霞狱奄豫沉淀分离法及其应用沉淀分离法及其应用;淮南王 刘安; 盐析法; 盐析法;盐析法; 等电点沉淀法 ; 有机溶剂沉淀??? ; 有机溶剂沉淀法 ; 有机溶剂沉淀法 ; 有机溶剂沉淀法;非离子型聚合物沉淀; 非离子型聚合物沉淀法 ;
PEG是一种特别有用的沉淀剂,因为无毒,不可燃性且对大多数蛋白质有保护作用。PEG沉淀法能在室温下进行,得到的沉淀颗粒较大,收集容易。
PEG的分子量需大于4000,最常用的是6000和20 000。所用的PEG浓度通常为20%,浓度再高,会使粘度增大,造成沉淀的回收比较困难。PEG对后续分离步骤,影响较少,因此可以不必除去。但它的存在会干扰A280和Lowry法测定蛋白质。
;非离子型聚合物沉淀法;热沉淀; 沉淀动力学 ; 沉淀动力学 ;Applications;水的净化;如何对一杯混浊的天然水进行处理?;自来水厂净水过程示意图;酪蛋白的制备;牛奶中提取酪蛋白;饶制今遇闸矽曾纷捻笔渔税盲矩延赢坪泰栓犬迈庶碾诣芳恕尊津遂越眉称沉淀分离法及其应用沉淀分离法及其应用
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