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离心超滤质谱筛选川乌中与人血清白蛋白相互作用的乌头类生物碱
Vol.34 高等 学校 化 学 学报 No.7
2013年7月 摇 摇 摇 摇 摇 摇 CHEMICALJOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES摇 摇 摇 摇 摇 摇 1635~1639
doi:10.7503/ cjc
摇 摇
离心超滤质谱筛选川乌中与人血清白蛋白
相互作用的乌头类生物碱
1,2 1 1,2 1 1
朱洪彬 ,刘摇 舒 ,王春艳 ,刘志强 ,宋凤瑞
(1. 中国科学院长春应用化学研究所,长春质谱中心,长春 130022;
2. 中国科学院大学,北京 100049)
摘要摇 采用离心超滤质谱技术从川乌总生物碱提取物中筛选与人血清白蛋白相互作用的乌头类生物碱成
n
分,并用LC鄄MS 技术对筛选出的活性成分进行了分离鉴定. 结果表明,从川乌总生物碱中筛选并鉴定出
9种与人血清白蛋白存在相互作用的乌头类生物碱:苯甲酰新乌头原碱、 苯甲酰乌头原碱、 10鄄OH鄄中乌头
碱、 中乌头碱、10鄄OH鄄乌头碱、乌头碱、次乌头碱、脱氧乌头碱和3,13鄄脱氧乌头碱.
关键词摇 川乌;离心超滤质谱;人血清白蛋白
中图分类号摇 O657.63摇 摇 摇 摇 文献标志码摇 A
人血清白蛋白(HSA)是人血浆中含量最丰富的载体蛋白,具有多种生理学功能. 作为许多内源性
和外源性化合物的存储和转运蛋白,HSA可与多种药物分子发生相互作用. 药物与HSA结合后可储留
于血浆中,减弱其最大作用强度,延长作用时间,避免药物迅速代谢[1~4]. 有关药物与HSA相互作用
的研究已有报道[5~7]. 毛莨科乌头属植物川乌(Aconitum Carmichaeli Debx. )为传统中药,具有祛风除
湿、温经止痛及消炎等多种药理活性,常用于风寒湿痹、关节疼痛及坐骨神经痛等的治疗,其主要活
性成分为二萜类生物碱,但其中活性较高的双酯型二萜类生物碱也同时具有较高的毒性[8~10]. 在分子
水平上研究中药川乌中有效成分和HSA 的相互作用,探讨乌头类药物与HSA 的结合特性,有助于了
解乌头类生物碱在人体内的吸收、分布、排泄、药理活性和毒性,对于阐明乌头类生物碱的作用机理、
指导临床用药和探索其在生命体系中的化学过程和生物物理过程具有重要的理论和实践意义.
离心超滤质谱是利用亲和原理将具有潜在活性的小分子化合物混合物与具有生物活性的受体(蛋
白质、DNA等)混合,从而得到受体鄄配体复合物和未结合的小分子的混合物. 进一步通过超滤方法将
[11]
未结合的小分子滤除后,受体鄄配体复合物经有机溶剂处理使小分子配体从复合物中释放出来 . 通
过LC鄄MS 联用技术,可对这些活性分子进行分离和鉴别n [12,13]. 离心超滤质谱筛选过程在缓冲溶液中
进行,因此中药小分子和生物大分子的作用更切合生物环境. 结合先进的超高效液相色谱和电喷雾串
联质谱分析技术,使该方法具有灵敏、快速及适合高通量筛选的特点. 本文采用离心超滤质谱技术研
n
究川乌生物碱成分与HSA 的相互作用,并用LC鄄MS 技术对与HSA有相互作用的成分进行分离鉴定,
以期建立研究中药成分生物利用度的离心超滤质谱方法.
1摇 实验部分
1.1摇 仪器与试剂
Finnigan LTQ XL 离子阱质谱仪和 Accela U鄄HPLC 超高效液相色谱系统(美国Thermo 公司);
Centrifuge5810R超速离心机(德国Eppendorf 公司);超滤离心管(截留分子量为30000)购自美国Pall
公司.
收稿日期:2012鄄10鄄25.
基金项目:国家自然科学基金(批准号:810730
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