利用正交实验法优化青藏高原湖泊沉积色素提取与分析.pdf

中国科学: 地球科学 2016 年 第46 卷 第4 期: 497 ~ 508 《中国科学》杂志社 SCIENTIA SINICA Terrae SCIENCE CHINA PRESS 论 文 生物有机指标在气候和环境变化研究中的应用进展专题 利用正交实验法优化青藏高原湖泊沉积色素 提取与分析 ①② ③④⑤⑥ ①② ⑦⑧ ①* 梁洁 , 李栋 , 王明达 , 张鑫雨 , 侯居峙 ① 中国科学院青藏高原研究所环境变化与地表过程重点实验室, 北京 100101; ② 中国科学院大学地球科学学院, 北京 100049; ③ 中国海洋大学海洋化学理论与工程技术教育部重点实验室, 青岛 266100; ④ 中国海洋大学化学化工学院, 青岛 266100; ⑤ 国家海洋局第二海洋研究所, 杭州 310012; ⑥ 国家海洋局海洋生态系统与生物地球化学重点实验室, 杭州 310012; ⑦ 北京大学地表过程重点实验室, 北京 100871; ⑧ 北京大学城市与环境学院, 北京 100871 * 通讯作者, E-mail: houjz@ 收稿日期: 2015-08-03; 接受日期: 2015-10-30; 网络版发表日期: 2015-08-25 国家重点基础研究发展计划项目(编号: 2012CB956100)和国家自然科学基金项目(批准号:资助 摘要 沉积色素已经成为反映浮游植物生物量和群落结构的有效指标, 被广泛应用到研究过去湖泊和海洋生 态系统初级生产力变化及其对气候变化与人类活动的响应中. 但是由于色素的特殊化学属性, 不同的提取和分 析方法对不同介质中的色素具有明显的选择性. 因此, 在不同区域, 为获得浮游植物生物量和群落结构等信息, 需 要选择合适的色素提取和分析方法. 本文利用 L 4 9(3 )正交实验方案, 对青藏高原中部典型半对流型湖泊(达则错)和 双季对流型湖泊(江错)表层沉积物进行对比研究, 选择适用于青藏高原湖泊沉积色素的提取和分析方法. 对比发现 : 提取试剂的类型及含量、色谱柱和流动相分别是影响湖泊沉积色素提取与分析过程中的关键因素. 利用丙酮 甲 : : : 醇 水混合试剂(80 15 5, 体积比), 冰浴超声 30s 并低温静置 6h 对于青藏高原湖泊沉积色素提取具有最佳提取效 率. 在进行色素分析时, 反相高效液相色谱(RP-HPLC)系统中采用 Eclipse Plus C8 色谱柱(150mm×4.6mm, 粒径为 : : : : : : : : 3.5m), 流动相A 为甲醇 乙腈0.25m 吡啶(50 25 25, 体积比); 流动相B 为甲醇 乙腈 丙酮(20 60 20, 体积比), 流动相A 的pH 利用醋酸调节为6, 柱温保持40 ℃时, 色素分离效果最好. 本研究为进一步利用青藏高原湖泊沉积 色素研究湖泊初级生产力变化和湖泊生态系统对气候变化和人类活动的响应提供了实验基础. 关键词 青藏高原, 湖泊沉积色素, 色素提取, 色素分析, 正交实验 中文引用格式