苯并(a)芘对雄性罗非鱼肝脏vtg mrna 表达的影响 - 生态环境学报.pdf

生态环境学报 2013, 22(11): 1837-1840 Ecology and Environmental Sciences E-mail: editor@ 苯并(a)芘对雄性罗非鱼肝脏 Vtg mRNA 表达的影响 1 1 1 1 2 1 1,2* 宋超 ，范立民 ，孟顺龙 ，裘丽萍 ，贾旭淑 ，胡庚东 ，陈家长 1. 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心，江苏 无锡 214081 ；2. 南京农业大学渔业学院，江苏 无锡 214081 摘要：卵黄蛋白原（Vitellogenin ，Vtg ）是检测环境雌激素的重要生物标志物，雄性鱼类Vtg mRNA 是检测环境雌激素的新 兴生物标志物。为研究BaP 是否具有环境雌激素效应，本试验对罗非鱼Oreochromis niloticus Vtg mRNA 进行研究，用总RNA 提取试剂盒提取得到雌鱼肝脏总RNA ，以转录得到的cDNA 为模板，以Primer 设计得到的引物，得到422 bp 的罗非鱼卵黄 蛋白原特异性cDNA 扩增片段;采用荧光定量PCR 法检测 10、50 μg·L-1 的BaP 暴露对罗非鱼肝脏Vtg 基因表达的影响，结 果发现4 d 、17 d 时雄性罗非鱼肝脏内Vtg mRNA 表达量与对照组无差异（P0.05 ），10 d 时10、50 μg·L-1 2 个剂量组Vtg mRNA 表达量显著高于对照组（P0.01 ），分别是对照组的113.18 倍和 121.79 倍。结果意味着BaP 可能具有环境雌激素效应。 关键词：罗非鱼；卵黄蛋白原；荧光定量PCR ；基因表达 中图分类号：X171.5 文献标志码：A 文章编号：1674-5906 （2013 ）11-1837-04 引用格式：宋超，范立民，孟顺龙，裘丽萍，贾旭淑，胡庚东，陈家长. 苯并(a)芘对雄性罗非鱼肝脏Vtg mRNA 表达的影响 [J]. 生态环境学报, 2013, 22(11): 1837-1840. SONG Chao, FAN Limin, MENG Shunlong, QIU Liping, JIA Xushu, HU Gengdong, CHEN Jiazhagn. Vtg mRNA expression in liver of male tilapia (Oreochromis niloticus) induced by BaP [J]. Ecology and Environmental Sciences, 2013, 22(11): 1837-1840. 卵黄蛋白原（Vitellogenin ，Vtg ）是非哺乳类 1.1 主要试剂与仪器 卵生动物卵黄蛋白的前体，鱼类的卵黄蛋白原通 UNlQ-10 柱式总RNA 抽提试剂盒、即用PCR 常由2 个相对分子质量为 150~220 kDu 的同源二 扩增试剂盒、SanPrep 柱式 DNA 胶回收试剂盒、 聚体组成，在卵黄形成期，在雌激素刺激下 Vtg Tris、溴化乙锭（EB ）购自上海生工生物工程股份 ® 有肝脏合成，通过血液运输到发育的卵巢中，被 有限公司；PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real ® 卵巢所吸收。Vtg 是雌鱼特异性蛋白，雄性和未成 Time) 、SYBR Premix Ex Taq™ II (Perfect Real 熟动物体内不存在或只有微量存在，但在雌激素 Time) 购自宝生物工程有限公司；三氯甲烷、乙醇