人血清中白蛋白与球蛋白的分离 - 天美(中国)科学仪器有限公司.pdfVIP

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2017-09-02 发布于天津
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人血清中白蛋白与球蛋白的分离 - 天美(中国)科学仪器有限公司

Marketing 天美（中国）科学仪器有限公司 TECHCOMP (CHINA) LTD. 中国北京朝阳区天畅园7 号楼1、3层 TEL:010 FAX:010 E-MAIL:techcomp@ 人血清中白蛋白与球蛋白的分离随着超速离心机转速的提高，用超速角式转头分离人血清中白蛋白与球蛋白的离心时间越来越短，用5—20％线性蔗糖梯度作蛋白质速率—区带（Rate—zonal）分离，样品以近等速沉降，低于分析实验结果。下面的简单分离实例有代表性。设备：离心机：智能型超速离心机（HitachiCP—WX系列）转头：定角：P90AT，P80AT，比较实验转头：P40ST P90AT:90,000rpm,700,000xg,8×12mlK=25 P80AT:80,000rpm,615,000xg,8×12mlK=27 P40ST:40,000rpm,284,000xg,6×13mlK=139 离心管：12ml及13mlPA管 CP-WX系列超速离心机样品：标准人血清1ml（2.5mg/ml），用0.15MNaCl溶解。 Marketing 天美（中国）科学仪器有限公司 TECHCOMP (CHINA) LTD. 中国北京朝阳区天畅园7 号楼1、3层 TEL:010 FAX:010 E-MAIL:techcomp@ 梯度液：5—20％线性蔗糖梯度，P90AT及P80AT梯度液量约9.5ml，P40ST梯度液量约9.6ml。方法：5—20％蔗糖梯度液上铺约1ml人血清，对P90AT及P80AT必须装满（用血清调节），P40ST 加样至距管口3mm。离心参数： P90AT：90,000rpm，2小时，2.5小时，3小时，5℃，加速“5”减速“5” P80AT：80,000rpm，2小时，2.5小时，3小时，5℃，加速“5”减速“5” P40ST：40,000rpm，14小时，16小时，18小时，5℃，加速“8”减速“8” 曲线绘制：用日立DGF—U梯度仪通过上口连续取样至带流动池分光光度计连续测O.D.（280nm）后收集。结果及分析：转头白蛋白峰顶距离从管口算起的容量（ml）球蛋白峰顶距离从管口算起的容量（ml） 2小时 2.5小时 3小时 2小时 2.5小时 3小时 P90AT 4.5 5.7 6.8 6.2 7.9 9 P80AT 4.3 5.5 6.6 6 7.6 8.7 14小时 16小时 18小时 14小时 16小时 18小时 P40ST 3.6 4.1 4.7 5.0 5.8 6.6