miR-338-3p、miR-92和miR-34a在神经母细胞瘤细胞增殖、侵袭和转移中的作用和机制研究.pdf

摘 要 i 第一部分mR-338-3p对神经母细胞瘤的增殖和侵袭的抑制作用 的研究 SK-N-MC增殖、侵袭和迁移能力的影响，miR靶基因的确定及靶基因功能的研究。 方法miRNA芯片结果发现miR在神经母细胞瘤中低表达，利用实时定量PCR验证 其结果。利用脂质体LipofectamineTM2000将miR一338—3pmimiCS和miR一338—3p 胞系，MTT法和克隆形成实验检测神经母细胞瘤细胞转染后的增殖情况，Transwell 侵袭小室实验检测转然后细胞的体外侵袭及迁移的能力。利用生物信息学技术预测 Western blot实验对靶基因进行验证。并利用实时定量PCR检测神经母细胞瘤中 靶基因的表达。最后，将靶基因的敲降质粒和过表达质粒以及对照空质粒分别瞬时 转染细胞， MTT法和克隆形成实验检测细胞的增殖情况，TransweIl侵袭小室实 验检测细胞的体外侵袭及迁移能力。 结果实时定量PCR显示与癌旁正常组织相比，miR一338—3p在神经母细胞瘤细胞 mimics后，细胞活性、克隆形成能 中低表达