关于2 细胞工程基础.pptVIP

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关于2 细胞工程基础

6. 有性生殖 * * * 细胞工程基础 了解与细胞工程相关的生物学、细胞学、细胞生物学和分子生物学有关学科知识 掌握细胞分化与全能性 * 细胞组成 细胞周期与细胞分裂 细胞凋亡与细胞坏死 细胞分化与脱分化 组织与器官 生殖与发育 * 1. 细胞组成 细胞是生命结构和功能的基本单位,是生命活动的基本单元。 1665年,英国Hooke用显微镜观察软木时发现蜂窝状的小孔,称之为细胞(cell)。 * 1.1 分子组成 O, C, H, N, P, S, K, Ca, Mg等 无机物 有机物 水(总重的75-80%) 无机盐(干重的2-5%,离子形式) 蛋白质 核酸 脂质 糖类 (干重的90%以上) * 1.2 结构组成 原核细胞 真核细胞 * 细胞膜(内膜系统)与细胞壁 * 细胞液 细胞溶质:细胞之内处于各个细胞器官之外的区域。 占细胞体积的55%左右。含上千种酶,催化糖酵解、糖合成、脂肪酸、氨基酸的合成。 内含细胞骨架,保持细胞形状,组织生化反应,帮助细胞运动。 细胞器 线粒体 叶绿体 核糖体 * 细胞核 真核细胞中的细胞控制中心 包含遗传信息(染色质) 与细胞中的其它细胞器通讯 * 2. 细胞周期与细胞分裂 细胞周期(cell cycle)是指一个细胞经生长、分裂增殖成两个细胞所经历的全过程。 细胞周期包括细胞间期与分裂期(M期)。 * * * * 3. 细胞凋亡与坏死 死亡是生命的普遍现象,但细胞死亡并非与机体死亡同步。正常的组织中,经常发生“正常”的细胞死亡,它是维持组织机能和形态所必需的。细胞死亡的方式通常有2种:①细胞坏死(necrosis)。②细胞凋亡(apoptosis)/细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)。 * 细胞凋亡 细胞凋亡(cell apoptosis)是借用古希腊语,表时细胞象秋天的树叶一样凋落的死亡方式。 1972年Kerr最先提出这一概念,他发现结扎大鼠肝的左、中叶门静脉后,其周围细胞发生缺血性坏死,但由肝动脉供应区的实质细胞仍存活,只是范围逐渐缩小,其间一些细胞不断转变成细胞质小块,不伴有炎症,后在正常鼠肝中也偶然见到这一现象。 * 细胞凋亡是机体维持环境稳定、有基因控制的细胞自主的有序性死亡。 * 凋亡细胞的主要特征: ①染色质聚集、分块、位于核膜上,胞质凝缩,最后核断裂,细胞通过出芽的方式形成许多凋亡小体; ②凋亡小体内有结构完整的细胞器,还有凝缩的染色体,可被邻近细胞吞噬消化,因始终有膜封闭,没有内溶物释放,故不会引起炎症; ③凋亡细胞中仍需要合成一些蛋白质,但是在坏死细胞中ATP和蛋白质合成受阻或终止; ④核酸内切酶活化,导致染色质DNA在核小体连接部位断裂,形成约200bp整数倍的核酸片段,凝胶电泳图谱呈梯状; * 细胞凋亡的检测 ?PS(磷脂酰丝氨酸)外翻(Annexin-V /PI) TUNEL * 2002年10月7日英国人悉尼·布雷诺尔、美国人罗伯特·霍维茨和英国人约翰·苏尔斯顿,因在器官发育的遗传调控和细胞程序性死亡方面的研究 ,获诺贝尔生理与医学奖。 * 细胞坏死 是细胞受到化学因素(如强酸、强碱、有毒物质)、物理因素(如热、辐射)和生物因素(如病原体)等环境因素的伤害,引起细胞死亡的现象。 坏死细胞的形态改变主要是由下列2种病理过程引起的,即酶性消化和蛋白变性。参与此过程的酶,如来源于死亡细胞本身的溶酶体,则称为细胞自溶(autolysis);若来源于浸润坏死组织内白细胞溶酶体,则为异溶(heterolysis)。 * 细胞坏死初期,胞质内线粒体和内质网肿胀、崩解,结构脂滴游离、空泡化,蛋白质颗粒增多,核发生固缩或断裂。 随着胞质内蛋白变性、凝固或碎裂,以及嗜碱性核蛋白的降解,细胞质呈现强嗜酸性,故坏死组织或细胞在苏木精/伊红染色切片中,胞质呈均一的深伊红色,原有的微细结构消失。在含水量高的细胞,可因胞质内水泡不断增大,并发生溶解,导致细胞结构完全消失,最后细胞膜和细胞器破裂,DNA降解,细胞内容物流出,引起周围组织炎症反应 。 * * 细胞凋亡和细胞坏死的区别 区别点 细胞凋亡 细胞坏死 起因 生理或病理性 病理性变化或剧烈损伤 范围 单个散在细胞 大片组织或成群细胞 细胞膜 保持完整,一直到形成凋亡小体 破损 染色质 凝聚在核膜下呈半月状 呈絮状 细胞器 无明显变化 肿胀、内质网崩解 细胞体积 固缩变小 肿胀变大 凋亡小体 有,被邻近细胞或巨噬细胞吞噬 无,细胞自溶,残余碎片被巨噬细胞吞噬 基因组DNA 有控降解,电泳图谱呈梯状 随机降解,电泳图谱呈涂抹状 蛋白质合成 有 无 调节过程 受基因调控 被动进行 炎症反应 无,不释放细胞内容物 有,释放内容物。 * 4. 细

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