实验 细胞内液泡系和线粒体的活体染色.pptVIP

细胞内液泡系和线粒体的活体染色;一、实验目的;二、定义及原理;活体染色分为体内活染和体外活染两种。前者是将染料注射于生物体内，染色后再取材观察。后者是取材后，对离体的活细胞进行染色。为保持离体细胞的正常存活，染色时需供给细胞以正常的温度，渗透压，PH等。 ; 在中性或微碱性环境中，植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌。由于液泡为酸性，因此进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而呈现樱桃红色。原生质和细胞壁一般不着色。 死细胞由于原生质变性凝固，细胞液不能维持在液泡内，用中性红染色不产生液泡着色现象；相反，中性红的阳离子却与带有一定负电荷的原生质及细胞核结合，而使原生质与细胞核带微红色 。; 在动物细胞内，凡是由膜所包围的小泡和液泡除线粒体外都属于液泡系，包括高尔基器、溶酶体、微体、消化泡、自噬小??、残体、胞饮液泡和吞噬泡，都是由一层单位膜包围而成。这些细胞器几乎每个细胞都有。 软骨细胞内含有较多的粗面内质网和发达的高尔基复合体，能合成与分泌软骨粘蛋白及胶原纤维等，因而液泡系发达。 中性红是液泡系特殊的活体染色剂，只将液泡系染成红色，在细胞处于生活状态时，细胞质及核不被染色，中性红染色可能与液泡中的蛋白有关。;2. 健那绿(Janus green B)染液，原来也曾译为詹纳斯绿B，是专一性染线粒体的活细胞染料，线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态(即有色状态)呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态。因此可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。线粒体能在健那绿染液中维持活性数小时，通过染色，可以在高倍显微镜下观察到生活状态的线粒体的形态和分布。;三、操作程序;实验报告