CDK2的研究进展.docxVIP

CDK2的研究进展摘要：CDK，即周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinases)是与细胞周期进程相对应的一套Ser/Thr激酶系统。各种CDK沿细胞周期时相交替活化，磷酸化相应底物，使细胞周期事件有条不紊地进行下去。对CDK2蛋白结构的认识，特别是一些抑制剂与CDK2复合物的晶体学认识，极大的推动了小分子抑制剂的设计和开发。通过抑制剂对CDK2的作用，可以有效的抑制肿瘤等细胞的生长，从而达到治疗疾病的作用。关键词：CDK2 ,抑制剂，疾病治疗CDK2 是完成 G1 期和进入S期一个非常关键的细胞周期蛋白依赖性激酶，CDK2与 cyclinE 结合并活化，维持 G1后期 pRb 的磷酸化，保证细胞顺利 通过 G1 期并进入 S 期。在S 期初期，CDK2 与 cyclinA 结合使 E2F 转录因子钝化，而 E2F 的钝化是 S 期完成的前提条件，E2F活性的持续将导致细胞凋亡。因此，选择性地抑制 CDK2/cylin A 可能导致 E2F 浓度的升高，进而导致细胞S期停滞或凋亡。 CDK2 的蛋白结构 与大多数的蛋白激酶类似， CDK2 蛋白折叠呈 双叶状。体积较小的 N-末端区主要由 β-折叠构 成，包括5 个反平行结构的 β-长链和一个 C-螺旋。 体积较大的 C-末端区则主要由 α-螺旋构成，并通过 柔性铰链与 N-末端相连接。而 ATP 的结合区就位 于这两个“叶状”之间的深裂，构成该深裂的螺旋环 是 CDK2 结构的独特之处，它决定着 ATP 或者蛋白 结合底物与 CDK2 的特异性结合，在细胞调控机制 中扮演着关键角色。CDK2的作用机制细胞周期蛋白依赖激酶2(Cyclin-dependent kinase 2, CDK2)属于CDK丝氨酸/苏氨酸激酶家族,是细胞G1/S期转换过程中的重要调控因子。CDK2可分别结合于Cyclin E和Cyclin A,随后CAK磷酸化其苏氨酸160位(Thr-160)而被激活,通过磷酸化众多底物而促进G1/S期的进程。然而除在细胞周期中发挥重要作用外,近年来CDK2也被发现在调控细胞自我更新和分化中起到关键作用。一些文献报道CDK2活性或表达可促进鼠神经母细胞瘤细胞、胚胎干细胞、小鼠中枢神经系统祖细胞和成年小鼠的髓鞘等的分化［1］。CDK2蛋白水平下降所引起的全反式视黄酸(ATRA)诱导AML(acute myeloid leukemia)细胞分化作用的增加可能是通过促进ATRA对分化相关转录因子网络的调控而实现的。CDK2可作为UPS(ubiquitin-proteasome system)途径的底物而被降解,ATRA在诱导AML细胞分化过程中促进CDK2通过UPS途径发生降解。CDK2的降解能够促进ATRA诱导AML细胞分化的作用,且这种促进作用并非由促进细胞退出增殖周期所介导,而是通过直接调控分化相关转录因子的信号网络而实现［4］。CDK2在AML细胞分化过程中的全新调控方式和功能的研究,为进一步完善和开发新型的白血病分化诱导治疗策略提供了理论基础。CDK2 激活前后结合位点的变化 CDK2 单体与 cyclinA， cyclinE 结合或者 Thr160 的磷酸化而被激活， CDK2激活后会引起空间多构 象的变化［2］，包括关键催化残基的再定位; 与 cyclinA 结合导致 C-螺旋( 包括保守的 PSTAIRE 序列) 朝向 ATP 结合区位移; 磷酸化作用使 CDK2 结构发 生再定向并产生多个肽段-底物结合位点等变化。单体CDK2 与 cyclinA 结合并磷酸化后，激酶活 性部位的关键结构要素会发生重排从而使 CDK2 完 全被激活。对比 5-磺酸-靛玉红与磷酸-CDK2cyclin A、单体 CDK2 形成复合物的结构可以发现， 激活后的 CDK2 的 N-末端相对于 C-末端会发生旋 转，进而导致活性部位的深裂发生微小的拓宽，但其 腺嘌呤口袋区的结合位点仍是保守的。此外， PSTAIRE 螺旋和 Glu51 以及随后氨基酸残基与 ATP 磷酸化的再重组等都将导致磷酸化结合位点的改 变，尤其是 Lys33 的迁移会使 ATP 深裂加深并形成 其他的空腔。 Kontopidis 等［4］通过描述 CDK2 非活化态与活 化态构象的不同以及非活化态的构象特征，分别对 6 种 CDK2 抑制剂在 CDK2 单体( 未活化) 和 cyclinA/CDK2 复合物( 被激活) 中的 X 晶体衍射进行了 分析，发现二者结构中 E51， V64， D145， L148 等残基 的侧链以及 Gly 环上 1015 残基上的原子的位置发 生了改变。此外，起催化作用的赖氨酸、 K33 在二者 结构中呈现不同的构象，并由此依次引发 CDK2 与 cyc