基因工程和细胞工程 课件.pptVIP

解析 体细胞核移植技术利用了动物细胞核的全能性；在供体细胞的细胞核移入受体细胞之前，必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏。哺乳动物胚胎的培养液成分一般都比较复杂，除一些无机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分以及血清等物质。克隆技术根本无法培育出完全相同的个体，原因可能是在细胞分裂中发生基因突变或个体发育中受细胞质基因及环境的影响。基因探针技术的原理是DNA分子杂交，可用于疾病诊断、生物检测等。 答案 （1）全能 （2）细胞核 维生素、激素、氨基酸、核苷酸 动物血清 （3）细胞分裂中可能发生基因突变或卵母细胞的细胞质内也有遗传物质DNA，也控制后代的性状表达 （4）基因工程 人的胰岛素基因 基因探针 考点三 DNA的提取与鉴定 1.DNA粗提取的原理 DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同。 溶解规律 2 mol/L NaCl 0.14 mol/L NaCl DNA 溶解 析出 蛋白质 NaCl溶液浓度从 2 mol/L降低过程 中，溶解度逐渐增大 部分发生 盐析沉淀 溶解 由上表可以看出，在NaCl溶液浓度为2 mol/L时，DNA溶解，而部分蛋白质发生盐析生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质；NaCl溶液浓度为0.14 mol/L时，DNA析出，过滤可除去溶解的部分蛋白质。 2.方法步骤 破碎细胞 鸡血细胞中加入一定量的蒸馏水，同时用 玻璃棒沿一个方向快速搅拌 纱布过滤，滤液中含DNA和其他核物质， 如蛋白质、RNA等 溶解核内DNA：上述滤液+2 mol/L的NaCl溶液，玻 璃棒沿同一方向搅拌 过滤除去不溶杂质 析出含DNA的丝状物：向上述滤液中缓缓加入蒸馏水， 并轻轻地沿一个方向搅拌，出现丝状物，当丝状物 不再增加时，停止加水（此时NaCl浓度为0.14 mol/L） 过滤，取含DNA的丝状物：用多层纱布过滤，含DNA的 丝状物留在纱布上 DNA丝状物再溶解：再次用2 mol/L的NaCl溶解DNA 提取含杂质较少的DNA：将上述滤液+体积分数为95% 的冷却的酒精静置2~3 min，溶液中出现白色丝状 物，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物 3.DNA的鉴定 （1）原理:DNA+二苯胺 蓝色 （2）步骤 沸水加热 5 min 项目 两支20 mL的试管 1号 2号 实 验 步 骤 加入2 mol/L的NaCl溶液 5 mL 5 mL 加入丝状物（DNA） - √ 用玻璃棒搅拌 - 丝状物溶解 加入二苯胺试剂 4 mL 4 mL 沸水浴加热 5 min 5 min 观察现象 不变蓝 变蓝 （09·江苏卷）下列关于DNA和蛋白质提取与分 离实验的叙述，正确的有（多选） （ ） A.提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞 B.用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质 C.蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNA D.蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化 解析 提取细胞中的DNA要用蒸馏水涨破细胞，提取 蛋白质要用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂；蛋白质提取 和分离过程中进行透析可除去相对分子质量较小的杂 质，而将大分子保留在袋内。故A、C项错误。 BD 如图为DNA的粗提取与鉴定实验装置： （1）实验材料选用鸡血球液，而不用鸡全血，主要原因是鸡血球液中有较高含量的 。 （2）在图A所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是 ，通过图B所示的步骤取得滤液，再在溶液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是 ；图C所示实验步骤中加蒸馏水的目的是 。 （3）为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA，可滴加 溶液，结果丝状物被染成绿色。 解析 “DNA粗提取与鉴定”的实验材料选用鸡血球液，而不用鸡全血，主要原因是DNA主要储存于细胞核内，而不在血浆内，使用鸡血球液提高材料中的细胞数量和DNA含量，从而可以保证实验提取到的DNA数量。图A、B、C所示为本实验的三个关键步骤。图A通过添加蒸馏水，血细胞与蒸馏水相混合而使血细胞处于极低浓度的溶液中，细胞因大量吸水而导致最终破裂，并释放出胞内物。图B通过纱布过滤使血细胞释放出的DNA滤入收集的滤液中（将大量胶状物滤出），再在滤液中加入2 mol/L的NaCl溶液使DNA的溶解度增加。图C在DNA浓盐溶液中加入蒸馏水（大量），可使溶液的NaCl浓度降至较底，由于DNA在 较低浓