低倍镜的使用.PPT

全国中等卫生职业教育卫生部“十一五”规划教材 实验一 显微镜的使用 基础教研室 实验目的 1. 认识显微镜的构造。 2. 掌握显微镜的使用。 3. 镜下能辨认细胞结构。 实验材料 1. 光学显微镜 2.肾组织切片（HE染色） 实验内容与方法 1.介绍实验室规则 2.显微镜的构造和使用方法 3.练习光镜的使用 4.观察辨认细胞膜、细胞质和细胞核 显微镜的发明和发展 1665年，英国的物理学家列文虎克（Hooke）用自己设计制造的显微镜下观察软木塞切片时发现其中有许多小室，状如蜂窝，他将其称之为“cell”，这是人类第一次发现细胞。由此创立了组织学时代，以后，生物学家就用“cell”一词来描述生物体的基本结构。 一、光学显微镜的构造 分机械和光学两部分。 （1）机械部分： 1）镜座 2）镜臂 3）载物台(玻片夹、推进器) 4）镜筒 5）焦距调节螺旋：粗调节螺旋和细调节螺旋 6）物镜转换器(旋转盘) （2）光学部分： 1）目镜：标有“10×”等放大倍数。 2）物镜： 低倍镜（ 4×） （10×） 高倍镜（40×） 油 镜（100×） 3）聚光器：装于载物台的下方，可聚集光线，增强视野的亮度。聚光器的底部装有光圈，可开大或缩小，控制光的进入量。 4）光源 5）电源开关 光学显微镜成像原理 二．光学显微镜的使用方法 （1）取镜： 取显微镜时，右手握住镜臂，左手托住镜座。 放置显微镜时，轻放、放稳，离实验台边缘5～10cm。 （2）对光： 先插好电源插座，再打开电源开关。 将低倍镜对准通光孔（向下）；左（双）眼对准目镜，打开光圈，调节聚光器，再调节电光源螺旋，使视野的亮度适宜。 （3）低倍镜的使用： 取一组织切片，正面朝上放在载物台上，用玻片夹夹住，用推进器将标本移到通光孔中央；用粗调节螺旋将载物台提高至距标本3～5mm左右处。边用目镜观察边转动粗调节螺旋，使载物台缓慢下降，当视野中有物象时，改用细调节螺旋，直到看清物象为止。 （4）高倍镜的使用： 先在低倍镜下找到需要放大观察的结构，用推进器移到视野中央；顺时钟转动旋转盘，换用高倍镜，再用细调节螺旋调节，便可看清物象。此时禁止使用粗调节螺旋，以免压坏玻片！！！ （5）显微镜的存放： 显微镜使用结束后，下降载物台，取下玻片，转动旋转盘使最短的一个物镜向下，将载物台提到最高位置，先关好电源，再拔出插头,套好显微镜罩,放回显微镜柜。 3．观察细胞 （1）低倍镜观察： 细胞质染成浅红色，细胞核染成蓝色，能分出细胞与细胞的界限。 （2）高倍镜观察： 细胞膜不太清楚，核内可看到不均匀的染色块，有的可看到核仁，细胞器一般看不到。 显微镜调节步骤 打开光圈，安放玻片，调整位置 ①4×（红色）→粗调上升载物台至最高→粗调下降载物台→细胞→细调（前后）→清晰→直接旋转旋转盘→ ②10×（黄色）→细调→清晰→旋转旋转盘→ ③40×（蓝色）→细调→清晰 ② ③过程中找不到细胞，请返回① HE染色法 苏木精 — 伊红染色法 ，简称HE染色法 ，常用的组织切片染色法之一 。 苏木精染液为碱性 ，主要使细胞核内的染色质（弱酸性）着紫蓝色 伊红为酸性染料 ，主要使细胞质（弱碱性）和细胞外基质着红色 。 注意事项 1、必须遵守操作规程，严格认真地按要求操作。取送显微镜时，应右手握住镜臂， 左手托住镜座，轻拿轻放。 切勿用 一只手斜提，前后摆动，防止目镜滑出跌落。 2、保护好镜头，揩试目镜、物镜上的灰尘或污物，必须使用专用的擦镜纸。 切勿用手指、手帕、纱布和普通纸擦。 注意事项 3、转动粗、细准焦螺旋时，不要用力过猛，以防止机件损伤，调节失灵。 4、转换物镜时要用眼睛从侧面观察，以免损伤物镜或压坏玻片。 5、镜检时，坐姿端正，一般用左眼观察物象，用右眼看着实验报告纸画图。两眼须同时睁开，以减少疲劳。 注意事项 6、切忌一面从目镜进行观察，一面使镜筒下降，这样容易使物镜压坏玻片。 7、载物台要保持清洁干燥。以免镜头等被污染和腐蚀。 8、在高倍镜下调节焦距时，切勿使用粗调节器，以免压坏标本，损坏物镜。 注意事项 9、高倍镜使用完毕，必须先下降载物台，移开镜头后再取出玻片标本，以免取玻片时擦损镜头的镜面。 10、绝对禁止随意取出目镜或拆下显微镜的其他部件，以免灰尘掉入镜筒、部件失落或损坏。 单层扁平上皮 单层立方上皮_——肾小管 单层柱状上皮 假复层纤毛柱状上皮 思考题 1、你为什么很难在玻片上找到组织切片标本？ 2、你在观察组织时为什么感到光亮度不够？ 3、你在观察组织时为什么总感到不够清晰？ 4、为什么在光学显微镜下观察细胞时感到细胞膜和细胞器看不清楚或看不到？ 1、你为什么很难在玻片上找到组织切片标本？ ①是否打开电源开关螺旋; ②是否打开聚光器的光圈 ; ③是否把组织标本移到了