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组织 3-羟-3- 甲戊二酰辅酶A （HMG-COA ）还原酶光谱法定量检测试剂盒产品 说明书（中文版） 主要用途 组织 3-羟-3- 甲戊二酰辅酶 A （HMG-COA ）还原酶光谱法定量检测试剂是一种旨在运用 3-羟-3- 甲戊二酰辅酶 A 作为底物，在还原酶的催化下，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH ）氧化后吸 光峰值的降低，即采用光谱法来测定组织裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科 学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解悬液、微粒体，或纯化酶样品 3-羟-3- 甲戊二酰辅 酶 A （HMG-COA ）还原酶的活性检测，以及抑制剂筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳 定。 技术背景 甲戊二羟酸通路（mevalonate pathway ），又称为3-羟-3- 甲戊二酰辅酶A （HMG-COA ）还原酶通路或甲戊二 羟酸依赖性通路，是所有高等真核生物和许多细菌具有的重要的细胞代谢通路，用于体内产生二甲基丙烯 焦磷酸（dimethylallyl pyrophosphate ；DMAPP ）和异戊二烯焦磷酸（isopentenyl pyrophosphate ；IPP ）作为 生物大分子合成的基础，包括蛋白质异戊二烯化、细胞膜维护、激素合成、蛋白固着、蛋白糖化等。3-羟 -3- 甲戊二酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA reductase ；HMGR ；EC1.1.1.34 ）是控制甲戊二 羟酸通路的关键的酶，调节胆固醇和类异戊二烯脂分子的产生。HMG-COA还原酶位于内质网膜上，含有8 个跨膜结构域，其中活性结构域在细胞浆里。HMG-COA还原酶是许多降脂药物的靶标，包括lovastatin （Mevacor ）、 atorvastatin （Lipitor ）、pravastatin （Pravachol ）和simvastatin （Zocor ）。在HMG-COA还原 酶的催化下，将4个电子的3-羟-3- 甲戊二酰辅酶A （HMG-COA ）还原为甲戊二羟酸（mevalonate ），同时产 生还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate ；NADPH ）被氧 化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（oxidized nicotinamide adenine dinucleotide phosphate ；NADP ），其 氧化后的吸光峰值变化（340nm 波长），来定量分析3-羟-3- 甲戊二酰辅酶A （HMG-COA ）还原酶的活性。 3-羟-3- 甲戊二酰辅酶A （HMG-COA ）还原酶反应系统为： 产品内容 清理液（Reagent A ） 毫升 裂解液（Reagent B ） 毫升 缓冲液（Reagent C ） 毫升 反应液（Reagent D ） 微升 底物液（Reagent E ） 微升 阴性液（）Reagent F 微升 产品说明书 1 份 保存方式 1 保存裂解液（Reagent B ）、缓冲液（Reagent C ）、反应液（Reagent D ）和 底物液（Reagent E ）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；反应液（Reagent D ） 和底物液（Reagent E ）避免光照；有效保证6月 用户自备 1.5毫升离心管：用于样品保存的容器 15毫升锥形离心管：用于样品制备的容器 （微型）台式离心机：用于样品制备 比色皿或酶标板：用于光谱分析的容器 分光光度仪或酶标仪：用于光谱分析 实验步骤 一、